Anticorps polyclonal de lapin contre PIP5K1A pour WB, IHC-P, ELISA - Q99755

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PIP5K1A

• PIP5K1A code pour la phosphatidylinositol 4-phosphate 5-kinase alpha de type I (PIP5KIalpha) de 68 kDa, une kinase lipidique centrale dans la signalisation par les phosphoinositides.
• Catalyse la conversion du phosphatidylinositol 4-phosphate (PI4P) en phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PIP2), un second messager lipidique essentiel. Cette activité constitue la voie majoritaire de synthèse du PIP2.
  Références associées : PMID:21477596, PMID:22942276, PMID:8955136
• Le PIP2 est un précurseur des seconds messengers inositol 1,4,5-trisphosphate (IP3), diacylglycérol (DAG) et phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate (PIP3), médiant ainsi de nombreuses cascades de transduction du signal.
  Références associées : PMID:19158393, PMID:20660631
• Grâce à la production de PIP2, PIP5K1A régule la dynamique du cytosquelette d'actine, l'adhésion cellulaire, la motilité, les ondulations membranaires et la formation d'adhérences focales. Il est nécessaire pour la phagocytose, l'adhésion plaquettaire, la différenciation des kératinocytes et la translocation des transporteurs de glucose induite par l'insuline.
• Dans le noyau, PIP5K1A active l'activité adénylyltransférase de TUT1 dans les speckles nucléaires, régulant ainsi la polyadénylation d'un ensemble spécifique d'ARNm.
  Références associées : PMID:18288197
• Il se localise sur la membrane cellulaire, dans le cytoplasme, le noyau, les speckles nucléaires et les projections cellulaires comme les ondulations et les lamellipodes, ce qui témoigne de ses fonctions multiples.
• Il est fortement exprimé dans le cœur, le placenta, le muscle squelettique, le rein et le pancréas, avec des niveaux plus faibles dans le cerveau, le poumon et le foie.
• Il est référencé comme une phosphoprotéine et une protéine contenant une liaison isopépdique avec des sites de conjugaison de type ubiquitine ; l'épissage alternatif génère plusieurs isoformes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région des acides aminés 231‑500 de la protéine PIP5K1A humaine, une région qui contient probablement des épitopes conservés ; la réactivité croisée avec la souris est donc attendue et confirmée par l'homologie de séquence sur ce segment. Nous vous recommandons de réaliser un alignement de séquence pour confirmer la réactivité avec d'autres espèces.
• Pour le Western blot, une bande proche de 63 kDa est attendue. Utilisez des lysats de tissus à forte expression de PIP5K1A (ex. cœur, muscle squelettique) comme contrôle positif, et incluez des marqueurs de poids moléculaire pour vérifier la taille de la bande.
• En immunohistochimie (IHC-P), des profils de coloration membranaire, cytoplasmique et nucléaire peuvent être observés selon le type cellulaire et le contexte. Optimisez la récupération d'antigène et incluez des contrôles négatifs pertinents (ex. absence d'anticorps primaire ou sérum pré-immun) pour évaluer la spécificité.
• La technique ELISA peut être utilisée pour le titrage de l'anticorps ou la détection de l'antigène. Validez le test avec la protéine PIP5K1A recombinante ou des lysats cellulaires, et déterminez les conditions optimales de revêtement et de détection.
• En tant qu'anticorps polyclonal, il peut détecter plusieurs isoformes ou produits de dégradation ; confirmez sa spécificité par des expériences de knockdown ou de surexpression dans votre système d'étude.

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