Phospho-ZAP70-Y493 Rabbit mAb - P43403

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de ZAP70

• ZAP70 (Tyrosine-protein kinase ZAP-70), également connu sous le nom de tyrosine kinase apparentée à Syk, est une protéine cytoplasmique de 70 kDa appartenant à la famille des kinases Syk.
• Il joue un rôle central dans l'immunité adaptative en régulant la signalisation des récepteurs des cellules T et B, affectant la motilité, l'adhésion, l'expression des cytokines et le développement des thymocytes.
• Lors de l'engagement du TCR, ZAP70 est recruté vers les motifs ITAM phosphorylés de CD3E et CD247/CD3Z à la membrane plasmique, ce qui soulève son auto-inhibition et conduit à son activation (PubMed:7509083). Références connexes : PMID:7509083
• Le ZAP70 activé phosphorylate les protéines adaptatrices clés LAT et LCP2, assemblant des complexes de signalisation qui stimulent la production de lymphokines, la prolifération des cellules T et leur différenciation.
• ZAP70 module également la dynamique du cytosquelette des cellules T, l'adhésion et la mobilité, et participe à la régulation négative du TCR en favorisant l'internalisation et la dégradation de CD247/CD3Z via CBL et les protéines adaptatrices SLA/SLA2.
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique et au niveau de la membrane cellulaire, avec une expression restreinte aux cellules T, aux cellules natural killer, aux thymocytes précoces et aux cellules B pro/pré.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation (critique pour l'activité), l'acétylation et l'ubiquitination ; la protéine possède des domaines SH2, un domaine kinase de liaison à l'ATP et de multiples sites de phosphorylation.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'anticorps cible le site de phosphorylation en Tyr493, un résidu critique pour l'activation de ZAP70 ; envisagez d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver l'épitope phospho.
• Pour l'IF/ICC, validez la spécificité de la coloration en utilisant un blocage avec un peptide non phosphorylé ou en traitant les cellules avec une phosphatase pour confirmer la perte du signal.
• Cet anticorps convient pour les ELISA ; lors de l'adaptation à d'autres immunoessais, effectuez un titrage et des tests dans votre matrice d'échantillon spécifique pour assurer la linéarité et la sensibilité.

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