pAb de lapin anti-Vimentine phosphorylée S56 pour WB, ELISA - P08670

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la vimentine

• La vimentine est une protéine de filament intermédiaire de type III codée par le gène VIM, majoritairement exprimée dans les cellules mésenchymateuses et largement utilisée comme marqueur de transition épithélio-mésenchymateuse (TEM).
• Les filaments de vimentine connectent le noyau, le réticulum endoplasmique et les mitochondries, jouant un rôle clé dans le maintien de la cytoarchitecture et la facilitation du positionnement des organelles lors de la migration cellulaire directionnelle.
• La vimentine interagit avec LARP6 pour stabiliser les ARNm de collagène de type I (COL1A1 et COL1A2), contribuant à la production de matrice extracellulaire et à la fibrose tissulaire.
• La protéine subit de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination ; la phosphorylation au niveau du Ser56 (cible de cet anticorps) est impliquée dans la régulation de la dynamique d'assemblage/désassemblage des filaments.
• La localisation sous-cellulaire est principalement cytoplasmique et cytosquelettique, avec des pools supplémentaires dans la matrice nucléaire, la membrane cellulaire et les axones neuronaux, ce qui reflète la diversité de ses rôles fonctionnels.
• L'expression tissulaire est élevée dans les fibroblastes et certaines cellules immunitaires, avec des niveaux variables dans les lignées cellulaires cancéreuses ; la vimentine est fréquemment surexprimée dans les tumeurs métastatiques et d'origine mésenchymateuse.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Ajoutez systématiquement des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse lors de la préparation des échantillons pour préserver le signal de phosphorylation du S56.
• Validez la spécificité de l'anticorps en traitant les échantillons avec la λ-phosphatase ou en utilisant des contrôles positifs avec inhibiteur de phosphatase ; la perte de signal après déphosphorylation confirme la spécificité pour la forme phosphorylée.
• Pour le Western blot, utilisez un gel SDS-PAGE réductant et transférez sur une membrane PVDF ou de nitrocellulose ; la bande attendue est d'environ 54 kDa (peut légèrement se décaler selon l'état de phosphorylation).
• Cet anticorps est également adapté pour l'ELISA ; optimisez les conditions de revêtement et les réactifs de détection selon votre format de test spécifique.
• La réactivité croisée est rapportée pour l'humain et le rat ; si vous utilisez d'autres espèces, réalisez une validation interne en raison de variations potentielles de séquence autour du site de phosphorylation.

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