Anticorps polyclonal de lapin Phospho-TIFA-T9 pour WB et ELISA - Q96CG3

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de TIFA

• TIFA (protéine d'interaction avec TRAF contenant un domaine FHA, également appelée T2BP, T6BP, TIFAA, PM14 et protéine activatrice de NF‑kappa‑B 20) contient un domaine forkhead‑associated (FHA) qui médie des interactions dépendantes de la phosphorylation.
• TIFA agit comme une molécule adaptatrice qui joue un rôle clé dans l'activation de la signalisation pro‑inflammatoire NF‑kappa‑B suite à la détection de motifs moléculaires associés aux pathogènes bactériens (PAMP). Références connexes : PMID:12566447, PMID:15492226, PMID:26068852
• Lors de la détection de l'ADP‑heptose (un PAMP bactérien) par la kinase ALPK1, ALPK1 phosphoryle TIFA sur Thr‑9, entraînant son homo-oligomérisation. Références connexes : PMID:30111836
• TIFA phosphorylée et oligomérisée favorise l'oligomérisation et la polyubiquitination de TRAF6, ce qui active à son tour TAK1 et IKK, stimulant la transcription médiée par NF‑kappa‑B des cytokines.
• TIFA est principalement localisée dans le cytoplasme, ce qui est cohérent avec son rôle de transmission de signaux des capteurs de pathogènes cytoplasmiques vers les cascades de kinases en aval.
• Modification post‑traductionnelle : la phosphorylation sur Thr‑9 est l'événement critique qui initie l'auto‑association de TIFA et sa fonction de signalisation.
• Mots‑clés UniProt : structure 3D, Cytoplasme, Immunité, Immunité innée, Phosphoprotéine, Protéome de référence.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique entourant le Thr‑9 du TIFA humain ; par conséquent, l'anticorps est censé reconnaître spécifiquement la forme phosphorylée sur Thr‑9. Pour le Western blot, incluez des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons et envisagez d'utiliser un contrôle de déphosphorylation pour confirmer la spécificité.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réagent de capture ou de détection ; validez le couplage avec des anticorps secondaires appropriés et optimisez les conditions de revêtement pour votre format d'antigène.
• Un contrôle positif pour la phosphorylation de TIFA peut être obtenu en traitant les cellules avec de l'ADP‑heptose ou en surexprimant ALPK1, ce qui induit fortement la phosphorylation sur Thr‑9.
• Compte tenu du faible poids moléculaire de TIFA (21 kDa), utilisez des gels SDS‑PAGE à pourcentage élevé (12–15 %) pour une séparation et un transfert optimaux.

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