Phospho-TBC1D4-S588 Lapin pAb pour WB, ELISA - O60343

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de TBC1D4

• TBC1D4, également connu sous le nom d'AS160 (substrat d'Akt de 160 kDa), est une protéine multidomaine qui fonctionne comme une protéine activatrice de GTPase (GAP) pour les protéines Rab, notamment RAB2A, RAB8A, RAB10 et RAB14.
• L'isoforme 2 de TBC1D4 joue un rôle critique dans la translocation de GLUT4 stimulée par l'insuline vers la membrane plasmique, augmentant ainsi l'absorption du glucose dans les adipocytes et les cellules musculaires squelettiques.
• TBC1D4 est une phosphoprotéine présentant plusieurs sites de phosphorylation ; la phosphorylation sur la Ser588 est associée à la signalisation de l'insuline et régule son activité GAP et son interaction avec les protéines 14-3-3.
• La protéine est largement exprimée, l'isoforme 1 étant fortement exprimée dans le muscle squelettique et le cœur, tandis que l'isoforme 2 est abondante dans la glande surrénale, la thyroïde, le poumon, le rein, le côlon, le cerveau et le tissu adipeux.
• Dans les îlots pancréatiques, l'expression de TBC1D4 est diminuée chez les patients atteints de diabète de type 2, ce qui la lie à la physiopathologie du diabète sucré.
• Au niveau subcellulaire, TBC1D4 se localise principalement dans le cytoplasme, où il interagit avec des vésicules et des composants de signalisation.
• Des modifications post-traductionnelles supplémentaires incluent l'acétylation et la méthylation, qui pourraient moduler davantage sa fonction.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux de cellules stimulées par l'insuline par rapport à des cellules non stimulées pour valider la détection dépendante de la phosphorylation ; incluez des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons.
• En raison du poids moléculaire élevé (~147 kDa), utilisez un pourcentage de gel approprié et des conditions de transfert pour assurer une détection efficace ; vérifiez la taille de la bande avec un marqueur de poids moléculaire.
• Dans ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la détection de phospho-peptides ; incluez des témoins de peptides non phosphorylés pour confirmer la spécificité.
• L'anticorps réagit de manière croisée avec le TBC1D4 humain, de souris et de rat ; validez dans l'espèce et le contexte tissulaire pertinents, en gardant à l'esprit les profils d'expression spécifiques aux tissus.
• En tant qu'anticorps polyclonal de lapin, la cohérence d'un lot à l'autre peut varier ; envisagez une re-validation lors du changement vers un nouveau lot.

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