Phospho-Syk-Y323 Lapin pAb pour WB, IF/ICC - P43405

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la tyrosine-protéine kinase SYK

• La tyrosine-protéine kinase SYK (tyrosine kinase de la rate, p72-Syk) est une tyrosine kinase non réceptrice qui médie la transduction du signal en aval d'une variété de récepteurs transmembranaires, y compris les immunorécepteurs classiques tels que le récepteur des cellules B (BCR). Références associées : PMID:12456653, PMID:15388330, PMID:34634301
• Via ses deux domaines SH2, SYK s'assemble en complexes de signalisation avec des récepteurs activés au niveau de la membrane plasmique en se liant aux domaines ITAM tyrosine-phosphorylés, un processus souvent initié par les kinases de la famille SRC.
• Dans les cellules B, SYK est essentielle pour la maturation lors de la transition pro-B à pré-B et phosphoryle des adaptateurs clés comme BLNK, ainsi que PLCG1 et BTK, pour propager la signalisation du BCR. Références associées : PMID:12456653
• SYK joue un rôle crucial dans l'immunité innée en médiant les réponses aux agents pathogènes fongiques, bactériens et viraux, par exemple via CLEC7A, conduisant à la production d'ERO et à l'activation de l'inflammasome.
• Au-delà des immunorécepteurs, SYK fonctionne en aval des récepteurs d'adhésion cellulaire, relayant l'activation médiée par les intégrines des neutrophiles et des macrophages, et est impliquée dans l'activation plaquettaire par le collagène et la podoplanine. Références associées : PMID:12387735
• SYK régule divers processus biologiques, y compris la maturation des ostéoclastes, le développement vasculaire et la réponse immunitaire intestinale via la production de cytokines médiée par NF-κB. Références associées : PMID:12387735, PMID:33782605
• Au niveau subcellulaire, SYK se trouve au niveau de la membrane cellulaire et dans le cytoplasme/cytosol. Elle est largement exprimée dans les cellules hématopoïétiques, en particulier dans les neutrophiles et tout au long du développement des cellules B.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation (le site Y323 est critique pour l'activation), et elle contient des domaines SH2 et un domaine kinase de liaison à l'ATP.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps a été généré contre un peptide phospho-spécifique entourant la tyrosine 323 de la SYK humaine. La séquence de l'immunogène correspond à un site de phosphorylation connu pour réguler l'activation de SYK et la signalisation en aval.
• Pour une détection optimale de la SYK phosphorylée, incluez des inhibiteurs de phosphatases dans tous les tampons de lyse et d'essai pour préserver l'état de phosphorylation de la protéine cible.
• Le produit est recommandé pour le WB et l'IF/ICC. En WB, une bande proche de 72 kDa est attendue. Pour l'IF/ICC, les étapes de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées pour les localisations membranaires et cytosoliques de la cible.
• Envisagez de valider l'anticorps dans votre système d'échantillon pertinent dans des conditions où la phosphorylation de SYK est induite (par exemple, stimulation du BCR) par rapport à des témoins non induits pour confirmer la spécificité.

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