mAb de lapin anti-Phospho-STING/TMEM173-S365 pour WB, ELISA - Q3TBT3

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de STING

• STING (stimulateur des gènes de l'interféron, également appelé TMEM173/ERIS/MITA) est un médiateur de la signalisation immunitaire innée qui détecte l'ADN cytosolique d'origine bactérienne et virale et stimule la production d'interférons de type I (IFN-α et IFN-β). Références associées : PMID:18818105, PMID:19433799, PMID:19776740
• Il agit en se liant aux dinucléotides cycliques, notamment le di-GMP cyclique bactérien (c-di-GMP) et le GMP-AMP cyclique (cGAMP) endogène produit par cGAS après la reconnaissance de l'ADN cytosolique. Références associées : PMID:21947006, PMID:23258412, PMID:23519410
• Après liaison au ligand, STING s'oligomérise, se transloque du réticulum endoplasmique vers l'appareil de Golgi et est phosphorylé par TBK1 sur le motif pLxIS (incluant la S365), ce qui entraîne le recrutement d'IRF3 et l'induction des interférons. Références associées : PMID:25636800, PMID:27324217, PMID:29973723
• STING déclenche également l'autophagie : la liaison au cGAMP induit son déplacement vers le compartiment ERGIC et la formation d'autophagosomes pour dégrader les pathogènes à ADN cytosolique. La fonction autophagique peut être découplée de la signalisation interféronique. Références associées : PMID:30568238
• STING est exprimé de manière ubiquitaire, mais il est enrichi dans les tissus immunitaires tels que la rate et le thymus, ainsi que dans les cellules dendritiques.
• Au niveau sous-cellulaire, STING réside sur la membrane du réticulum endoplasmique ; après activation, il transite par l'ERGIC et l'appareil de Golgi, et peut se localiser dans les autophagosomes, les mitochondries et la membrane cellulaire.
• La phosphorylation de la sérine 365 (S365) dans le motif pLxIS est essentielle pour l'activation d'IRF3 médiée par STING et la production d'interférons. La forme phosphorylée en S365 est un marqueur d'activation clé.
• De plus, STING pourrait jouer un rôle dans l'apoptose via son association avec le CMH-II et dans la propagation intercellulaire de la signalisation antivirale. Références associées : PMID:18559423

Conseils expérimentaux et techniques

• Cet anticorps a été généré à partir d'un immunogène phosphopeptidique synthétique autour de la S365 ; il détecte spécifiquement la forme phosphorylée de STING. Pour le Western blot, il est recommandé d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons pour préserver l'état de phosphorylation.
• Pour valider la spécificité, traitez les lysats cellulaires avec une phosphatase ou comparez les signaux entre des conditions stimulées (par exemple, traitées au cGAMP) et non stimulées.
• Pour l'ELISA, optimisez les étapes de blocage et de lavage pour réduire la liaison non spécifique, et titrez l'anticorps pour déterminer la concentration optimale.
• Cet anticorps est validé pour les échantillons de souris ; la réactivité croisée avec d'autres espèces doit être confirmée expérimentalement si nécessaire.

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