Anticorps monoclonal lapin Phospho-Smad5-S465 pour WB, ELISA - Q99717

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Smad5

• SMAD5 (homologue 5 de Mothers against decapentaplegic, également appelé JV5-1, MADH5) est un membre de la famille SMAD de régulateurs transcriptionnels.
• Après stimulation par un ligand BMP, SMAD5 est phosphorylé au niveau de la Ser465 par les récepteurs BMP de type I activés, ce qui permet la formation d'un complexe avec SMAD4 et la translocation nucléaire pour réguler la transcription.
  Références associées : PMID:9442019
• Le complexe SMAD activé se lie aux éléments de liaison Smad (SBE) dans les promoteurs des gènes cibles pour moduler l'issue du réseau de signalisation.
  Références associées : PMID:33510867
• SMAD5 joue un rôle essentiel dans le développement embryonnaire, la différenciation cellulaire, l'angiogenèse et l'homéostasie tissulaire.
  Références associées : PMID:12064918 PMID:16516194
• SMAD5 non phosphorylé exerce des fonctions cytoplasmiques et mitochondriales dans le métabolisme énergétique, favorisant la respiration mitochondriale et la glycolyse via son interaction avec l'hexokinase 1.
  Références associées : PMID:28675158
• SMAD5 est exprimé de manière ubiquitaire et se localise dans le cytoplasme, le noyau et la mitochondrie.
• La protéine subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation et l'acétylation, et contient un domaine de liaison au zinc essentiel pour l'interaction avec l'ADN.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'anticorps a été obtenu contre un phosphopeptide synthétique correspondant aux résidus autour de la Ser465 du Smad5 humain, ce qui garantit une détection spécifique de la forme phosphorylée.
• Pour le Western blot, utilisez des protocoles standards avec des membranes PVDF ou de nitrocellulose ; pensez à ajouter des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour préserver l'état de phosphorylation.
• En ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; optimisez les conditions d'enrobage et de détection pour le format d'essai spécifique.
• La réactivité croisée avec le Smad5 humain, murin et de rat a été confirmée ; validez-la dans l'espèce et le type d'échantillon concernés avant toute utilisation expérimentale.
• Le poids moléculaire prédit de Smad5 est d'environ 52 kDa ; une bande à cette taille confirme la spécificité.

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