Phospho-SHIP1-Y1020 pAb de lapin pour WB, ELISA - Q92835

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SHIP1

• Codée par le gène INPP5D, SHIP1 (inositol 5'-phosphatase 1 contenant un domaine SH2) est une protéine de 133 kDa également connue sous le nom de SIP-145, hp51CN ou p150Ship, et appartient à la famille des inositol polyphosphate-5-phosphatases.
• Elle agit comme un régulateur négatif clé de la voie de signalisation PI3K en hydrolysant le 5-phosphate du phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate (PtdIns(3,4,5)P3) pour générer du PtdIns(3,4)P2. Références associées : PMID:10764818 PMID:8723348 PMID:8769125
• Elle hydrolyse également d'autres substrats phosphoinositides, notamment PtdIns(4,5)P2, Ins(1,4,5)P3 et Ins(1,3,4,5)P4, modulant ainsi largement les signaux médiés par les phosphoinositides. Références associées : PMID:40969890
• Elle constitue un régulateur négatif critique dans les cellules immunitaires et hématopoïétiques en mettant fin à la transduction du signal des récepteurs activateurs, notamment le récepteur d'antigène des cellules B, le FCGR2B et le CD32a, et en contrôlant des processus comme la prolifération des cellules myéloïdes, la dégranulation des mastocytes, la cytotoxicité des cellules NK et la signalisation JNK dans les cellules B. Références associées : PMID:16682172
• Subcellulairement, elle se localise dans le cytoplasme, la membrane cellulaire, les radeaux membranaires et le cytosquelette, ce qui est cohérent avec ses rôles dynamiques dans la signalisation.
• Son expression est hautement spécifique des cellules immunitaires et hématopoïétiques, notamment la moelle osseuse, le sang, les cellules progénitrices CD34+ et les cellules T, avec des niveaux plus faibles dans les cellules matures CD33+ et les cellules B.
• Elle contient des domaines fonctionnels comme un domaine SH2 et une région de liaison SH3, et son activité est régulée par phosphorylation sur tyrosines, notamment au niveau du résidu Y1020, ce qui la relie aux réseaux de signalisation médiés par les phosphotyrosines.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, utilisez un protocole de détection spécifique des phosphorylations ; l'anticorps cible Y1020 phosphorylé, donc ajoutez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour préserver l'épitope. Une bande proche de 133 kDa est attendue.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser des peptides phosphorylés et non phosphorylés comme contrôles de spécificité pour confirmer la liaison phospho-dépendante.
• Étant donné que l'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique, une pré-adsorption avec le peptide non phosphorylé peut aider à confirmer la spécificité pour la forme phosphorylée, bien que cela ne soit pas systématiquement requis.
• Cet anticorps est réactif avec des échantillons humains ; validez ses performances dans le type cellulaire concerné (par exemple, lignées immunitaires ou hématopoïétiques) car son expression est limitée à certains tissus.
• Les dilutions et conditions optimales doivent être déterminées empiriquement pour chaque système d'analyse.

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