AcM de lapin anti-Phospho-Rpb1 CTD-S2/S5 - P24928

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la sous-unité RPB1 de l'ADN-directed RNA polymerase II

• La sous-unité RPB1 de l'ADN-directed RNA polymerase II (également connue sous le nom de POLR2A) est le composant catalytique central et le plus grand de l'ARN polymérase II, responsable de la synthèse des précurseurs d'ARNm et de nombreux ARN non codants fonctionnels. Références associées : PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:30190596
• Le cycle de transcription de la Pol II comprend l'initiation, l'élongation et la terminaison. Pendant l'initiation, le complexe pré-initiation s'assemble au niveau des promoteurs ; l'élongation implique la synthèse processive d'ARN ; la terminaison libère le transcrit. Références associées : PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:28108474
• L'enzyme catalyse l'addition de nucléotides via un mécanisme à deux ions métalliques, avec POLR2A contribuant par un motif DxDGD coordonnant le Mg²⁺ et POLR2B fournissant une coordination supplémentaire. Références associées : PMID:30190596 PMID:8381534 PMID:9852112
• Possède une activité de relecture exonucléase 3'→5', permettant l'élimination des nucléotides mal incorporés. Références associées : PMID:8381534
• Le domaine C-terminal (CTD) unique est composé de 52 répétitions de l'heptapeptide (YSPTSPS) et subit une phosphorylation dynamique, principalement aux résidus Ser2 et Ser5, qui régule l'échappement du promoteur, l'élongation et le traitement de l'ARNm. Références associées : PMID:24207025 PMID:26124092
• L'acétylation et la méthylation de la lysine du CTD équilibrent l'expression génique, l'acétylation favorisant la transcription des gènes induits par les facteurs de croissance et la méthylation réprimant généralement l'expression. Références associées : PMID:24207025 PMID:26124092
• De plus, RPB1 peut fonctionner comme une ARN polymérase ARN-dépendante, allongeant les ARN non codants, et agit dans la réplication du virus de l'hépatite delta.
• Localisation subcellulaire : principalement nucléaire, mais également retrouvée dans le cytoplasme et associée aux chromosomes.

Guide expérimental et conseils techniques

• Lors de la réalisation d'un Western blot, assurez-vous que les tampons de lyse contiennent des inhibiteurs de phosphatase pour préserver la phosphorylation du CTD. Incluez un contrôle traité par une phosphatase pour confirmer la spécificité phospho.
• Pour l'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) et le CUT&Tag, cet anticorps peut aider à établir le profil d'occupation de l'ARN polymérase II et des motifs de phosphorylation Ser2/Ser5 à travers le génome.
• En ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour quantifier les niveaux de phospho-POLR2A dans des lysats ou des échantillons purifiés.

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