Phospho-RPA2-S4/S8 Lapin pAb - P15927

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la sous-unité 32 kDa de la protéine de réplication A

• La sous-unité 32 kDa de la protéine de réplication A (RPA2, également connue sous le nom de RPA32, RP-A p32, RP-A p34) est un composant du complexe hétérotrimérique de la protéine de réplication A (RPA), qui comprend RPA1, RPA2 et RPA3.
• La RPA se lie et stabilise les intermédiaires d'ADN simple brin (ssDNA) générés pendant la réplication de l'ADN et le stress de l'ADN, empêchant la réassociation et facilitant le recrutement des protéines du métabolisme de l'ADN.
• Dans la réponse cellulaire aux dommages de l'ADN, la RPA est cruciale pour la réparation de l'ADN et l'activation des points de contrôle. Elle recrute le complexe kinase ATR-ATRIP sur les sites de dommages à l'ADN, initiant la cascade de réponse aux dommages de l'ADN.
• La RPA recrute des facteurs de réparation clés sur la chromatine, notamment RAD51 et RAD52 pour la réparation des cassures double brin, ainsi que XPA et XPG pour la réparation par excision de nucléotides (NER). Elle participe également à la réparation par excision de base (BER) via une interaction avec UNG.
• La RPA stimule l'activité hélicase 5'-3' de BRIP1/FANCJ, qui est impliquée dans la réparation des pontages interbrins.
  Références associées :
  PMID:17596542
• La RPA est principalement localisée dans le noyau et se trouve dans les corps PML, ce qui est cohérent avec ses rôles dans le métabolisme de l'ADN.
• RPA2 est une phosphoprotéine sujette à diverses modifications post-traductionnelles, y compris l'acétylation, l'ubiquitination et l'épissage alternatif, qui régulent sa fonction dans la signalisation des dommages à l'ADN.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour de S4 et S8 de la RPA2 humaine. Pour la confirmation par Western blot, envisagez d'utiliser des lysats cellulaires traités à la phosphatase pour vérifier la perte du signal phospho-spécifique.
• Le poids moléculaire prédit de la RPA2 non modifiée est de 29 kDa ; cependant, la phosphorylation ou d'autres modifications peuvent affecter la migration. Utilisez des marqueurs de poids moléculaire appropriés et validez dans votre système d'échantillons.
• Cet anticorps est recommandé pour le WB et l'ELISA. Pour l'ELISA, titrez l'anticorps pour déterminer la dilution de travail optimale et incluez un contrôle avec un peptide non phosphorylé pour assurer la spécificité.
• Une réactivité croisée avec la RPA2 de rat a été rapportée ; si vous utilisez des échantillons de rat, validez les performances dans vos conditions expérimentales.

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