pAb de lapin Phospho-RB-S811 pour WB, ELISA - P06400

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RB

• RB est une protéine suppresseur de tumeur qui régule de façon critique la transition G1/S du cycle cellulaire en contrôlant la transcription dépendante d'E2F. Références associées : PMID:10499802
• Dans sa forme hypophosphorylée, RB se lie aux facteurs de transcription E2F, bloque physiquement leur domaine de transactivation et recrute des enzymes modifiant la chromatine pour réprimer la transcription génique. Références associées : PMID:10499802
• La phosphorylation de RB médiée par les Cycline/CDK induit sa dissociation des E2F, permettant la transcription des gènes de phase S et la progression du cycle cellulaire ; la phosphorylation par CDK3/cycline-C favorise spécifiquement la transition G0-G1. Références associées : PMID:10499802 PMID:15084261
• RB contribue également à la formation de l'hétérochromatine en stabilisant la méthylation des histones et en recrutant des méthyltransférases d'histones comme SUV39H1, maintenant ainsi la structure constitutive de l'hétérochromatine.
• Au niveau subcellulaire, RB se localise principalement dans le noyau mais peut également être détecté dans le cytoplasme.
• Les modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation et la méthylation, régulent l'activité de RB ; les oncoprotéines virales (par exemple l'antigène T grand de SV40, HPV E7) peuvent perturber les complexes RB-E2F, ce qui met en évidence son rôle dans les interactions hôte-virus.
• L'expression tissulaire inclut la rétine et les kératinocytes du prépuce (au niveau protéique). Références associées : PMID:20940255

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour l'analyse par Western blot, ajoutez des inhibiteurs de phosphatase dans les tampons de lyse pour préserver la phosphorylation de RB sur Ser811.
• Validez la spécificité de l'anticorps par test de compétition peptidique avec le peptide immunogène phosphorylé ou par traitement à la phosphatase des lysats cellulaires.
• Sélectionnez des lignées cellulaires ou des échantillons tissulaires avec une phosphorylation connue de RB sur Ser811 (par exemple les lignées de cellules cancéreuses en cycle) comme contrôles positifs.
• Pour les applications ELISA, titrez l'anticorps pour déterminer les conditions optimales de revêtement et de détection, en réalisant des courbes d'étalonnage avec des contrôles phospho-peptide et non phosphorylé pour confirmer la spécificité.

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