Anticorps monoclonal lapin Phospho-RB-S795 pour WB, IHC-P, ELISA - P06400

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine associée au rétinoblastome

• La protéine associée au rétinoblastome (RB1, également appelée pRb, p105-Rb, p110-RB1, pp110) est une protéine suppresseur de tumeur codée par le gène RB1 chez l'homme.
• RB1 est un régulateur clé de la transition G1/S du cycle cellulaire. Dans son état hypophosphorylé, elle se lie et inhibe les facteurs de transcription E2F, réprimant la transcription des gènes nécessaires à l'entrée en phase S. Références associées : PMID:10499802
• La phosphorylation de RB1 médiée par les cycline-dépendantes kinases (CDK) rompt son interaction avec les E2F, levant la répression transcriptionnelle et permettant la progression du cycle cellulaire. Références associées : PMID:10499802
• RB1 favorise également la transition G0-G1 par phosphorylation par CDK3/cycline-C, soulignant davantage son rôle régulateur dans l'entrée et la sortie du cycle cellulaire. Références associées : PMID:15084261
• Au niveau sous-cellulaire, RB1 est principalement nucléaire mais peut également être trouvée dans le cytoplasme, ce qui est cohérent avec ses fonctions de régulation de la transcription et d'organisation de la chromatine.
• RB1 est impliquée dans la formation de l'hétérochromatine et le silence épigénétique en recrutant des histones méthyltransférases (par exemple SUV39H1, KMT5B, KMT5C) et des histones désacétylases, maintenant ainsi la structure de la chromatine.
• L'expression tissulaire inclut la rétine et les kératinocytes du prépuce, où la protéine RB1 a été détectée.
• De plus, RB1 est ciblée par les oncoprotéines virales telles que l'antigène grand T du SV40, l'E7 du HPV et l'E1A de l'adénovirus, qui rompent les complexes RB1-E2F pour favoriser la réplication virale.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique correspondant aux résidus autour du Ser795 de la RB humaine. Pour évaluer la spécificité, pensez à comparer les signaux avec ceux obtenus avec un anticorps RB non phospho-spécifique ou des échantillons traités à la phosphatase.
• Pour le Western blotting, RB1 est une grande protéine (environ 106 kDa) ; assurez-vous que les conditions de transfert sont adaptées et utilisez des marqueurs précolorés pour confirmer le poids moléculaire.
• En immunohistochimie (IHC-P), les étapes de récupération d'antigène et de blocage peuvent influencer la coloration ; optimisez ces paramètres dans votre système tissulaire spécifique.
• L'anticorps montre une réactivité croisée avec la RB1 de souris et de rat, ce qui permet son utilisation dans des études impliquant des lignées cellulaires ou des tissus de rongeurs ; validez néanmoins les niveaux d'expression et l'état de phosphorylation dans votre modèle.
• Compte tenu de son application en ELISA, assurez-vous que l'épitope phosphorylé est préservé dans le tampon de revêtement et que les agents de blocage n'interfèrent pas avec la liaison phospho-spécifique.

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