pAb de lapin Phospho-Rac1/2/3-S71 pour WB, ELISA - P63000/P15153/P60763

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Rac1/2/3

• Rac1 est une petite GTPase associée à la membrane plasmique qui cycle entre un état actif lié au GTP et un état inactif lié au GDP, régulant ainsi divers processus cellulaires incluant le trafic sécrétoire, la phagocytose des cellules apoptotiques, la polarisation des cellules épithéliales et la formation de replis membranaires induite par les facteurs de croissance.
  Références associées : PMID:1643658 | PMID:22843693 | PMID:23512198
• Stimule l'activité kinase de PKN2, contribuant aux cascades de signalisation en aval.
  Références associées : PMID:9121475
• Nécessaire pour la translocation de DSG3 vers les jonctions cellule-cellule et l'organisation des faisceaux de F-actine corticaux, ancrant le cytosquelette d'actine au niveau des jonctions cellulaires.
  Références associées : PMID:22796473
• Agit en tant que sous-unité du complexe NADPH oxydase des phagocytes, médiant le transfert d'électrons du NADPH cytosolique vers l'O2 pour générer des anions superoxyde.
  Références associées : PMID:38355798
• Dans les neurones, participe à la morphogenèse des épines dendritiques et à la formation des synapses, et régule la stabilité synaptique des récepteurs GABA(A) par la stabilisation de la F-actine médiée par PAK1 (par similarité).
• L'isoforme B possède un échange GDP/GTP indépendant du GEF accéléré et une hydrolyse du GTP altérée, une propriété partiellement restaurée par les protéines activatrices de la GTPase ; il est principalement exprimé dans la peau et l'épithélium intestinal et est régulé à la hausse dans les tumeurs colorectales.
  Références associées : PMID:14625275
• Se localise au niveau de la membrane cellulaire, des mélanosomes, du cytoplasme, des lamellipodes, des dendrites, des synapses, du noyau et de la membrane des replis membranaires, ce qui reflète ses rôles multiples dans la motilité et la signalisation.
• Classé comme phosphoprotéine, protéine liant le GTP et lipoprotéine, il est soumis à la prénylation, la palmitoylation et la conjugaison à l'ubiquitine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Étant donné que cet anticorps reconnaît la phosphorylation sur la Serine 71, ajoutez des inhibiteurs de phosphatases (par exemple orthovanadate de sodium, NaF) dans les tampons de lyse pour préserver l'épitope phosphorylé.
• Vérifiez la détection dépendante de la phosphorylation en traitant les échantillons avec de la lambda phosphatase ou en réalisant une compétition peptidique avec le peptide non phosphorylé homologue.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 21 kDa est attendue ; optimisez les conditions de blocage (par exemple 5 % de BSA dans du TBST) pour minimiser la liaison non spécifique.
• En ELISA, immobilisez le peptide phosphorylé ou revêtez directement les cellules/extraits et utilisez un contrôle non phosphorylé pour évaluer la spécificité.

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