Anticorps polyclonal de lapin Phospho-PRKCQ-T538 pour WB, ELISA - Q04759

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PRKCQ

• PRKCQ (Protéine kinase C de type thêta, nPKC-thêta) est une sérine/thréonine-protéine kinase indépendante du calcium, dépendante des phospholipides et du diacylglycérol, qui joue des rôles non redondants dans la signalisation du récepteur des cellules T (TCR).
• Dans les cellules T co-stimulées par TCR-CD3/CD28, elle est nécessaire à l'activation de NF-kappa-B et JUN, essentielle à la production d'IL2, et participe à la transactivation de NFATC1/NFATC2. Références associées : PMID:21964608
• Elle médie l'activation de la voie canonique NF-kB en phosphorylant CARD11, conduisant au recrutement du complexe BCL10-MALT1 et à l'activation d'IKK.
• PRKCQ est cruciale pour la différenciation des lymphocytes T auxiliaires, étant nécessaire au développement des cellules Th2 et Th17, et joue un rôle mineur dans la réponse Th1 ; elle fournit également des signaux de survie en phosphorylant BAD et en régulant à la hausse BCL-XL.
• Au-delà des cellules T, dans les plaquettes, elle régule la transduction du signal en aval d'ITGA2B et d'autres récepteurs, jouant un rôle positif dans la signalisation "outside-in" et la sécrétion des granules.
• Elle peut médier les effets inhibiteurs des acides gras libres sur la signalisation de l'insuline en phosphorylant IRS1, bloquant ainsi l'activation de la voie PI3K/AKT.
• PRKCQ phosphoryle CCDC88A/GIV et inhibe son activité de facteur d'échange de nucléotides guanine. Références associées : PMID:23509302
• Elle active également LRRK1, qui phosphoryle les protéines RAB impliquées dans le trafic intracellulaire. Références associées : PMID:36040231
• Localisation subcellulaire : Cytoplasme et membrane cellulaire.
• Spécificité tissulaire : Exprimée dans le muscle squelettique, les cellules T, les cellules mégacaryoblastiques et les plaquettes.
• Les MOTS-CLÉS indiquent qu'il s'agit d'une phosphoprotéine impliquée dans l'immunité et la réponse inflammatoire, avec des domaines doigt de zinc et kinase.
• La protéine subit un épissage alternatif et présente des modifications par liaison isopeptidique et conjugaison Ubl.

Guide expérimental et conseils techniques

• La conception de l'immunogène cible la phosphorylation sur Thr538. Pour préserver cette modification labile, incluez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse et évitez les cycles de congélation-décongélation des échantillons.
• Pour le western blot, utilisez un agent de blocage doux (par exemple, 5% BSA) pour réduire la liaison non spécifique ; confirmez la spécificité de l'anticorps en traitant les échantillons avec de la phosphatase lambda avant l'électrophorèse.
• La validation dans un contexte cellulaire pertinent est recommandée : dans des lignées de cellules T humaines (par exemple, Jurkat) stimulées via anti-CD3/CD28, une bande à ~82 kDa doit être observée, indiquant la phosphorylation de PRKCQ.
• Pour la détection par ELISA, un phosphopeptide couvrant le site T538 peut servir de contrôle positif ; la réactivité croisée avec le peptide non phosphorylé doit être évaluée.

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