Phospho-PRKCQ-S676 Lapin pAb - Q04759

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PRKCQ

• PRKCQ (Protéine kinase C de type thêta), également connue sous le nom de nPKC-thêta, est une sérine/thréonine-protéine kinase indépendante du calcium et dépendante des phospholipides et du diacylglycérol, codée par le gène PRKCQ. Elle joue des rôles non redondants dans la signalisation du récepteur des lymphocytes T (TCR), essentiels pour l'activation, la prolifération, la différenciation et la survie des lymphocytes T. Références associées : PMID:21964608
• Dans les lymphocytes T co-stimulés par TCR-CD3/CD28, PRKCQ est nécessaire pour l'activation de NF-kappa-B et JUN, conduisant à la production d'IL2, et participe à la transactivation dépendante du calcium de NFATC1 et NFATC2. Références associées : PMID:21964608
• PRKCQ phosphoryle directement CARD11 sur des résidus sérine, favorisant l'association de CARD11 avec les radeaux lipidiques et le recrutement du complexe BCL10-MALT1 pour activer la voie canonique NF-kappa-B. Elle phosphoryle également STK39/SPAK pour médier l'activation de JUN. Références associées : PMID:21964608
• Au-delà des lymphocytes T, PRKCQ régule la transduction du signal dans les plaquettes en aval des récepteurs ITGA2B, CD36/GP4, F2R/PAR1 et F2RL3/PAR4, jouant un rôle positif dans la signalisation 'outside-in' et la sécrétion des granules. Elle pourrait également inhiber la signalisation de l'insuline en phosphorylant IRS1. De plus, PRKCQ phosphoryle MSN, PDPK1, CCDC88A/GIV et LRRK1, impactant divers processus cellulaires. Références associées : PMID:23509302, PMID:36040231
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique, avec une translocation dépendante du stimulus vers la membrane cellulaire, ce qui est cohérent avec son rôle dans la transduction des signaux provenant des récepteurs de surface cellulaire.
• L'expression tissulaire est importante dans le muscle squelettique, les lymphocytes T, les cellules mégacaryoblastiques et les plaquettes, correspondant à ses fonctions clés dans les cellules immunitaires et le muscle.
• Cet anticorps est produit contre un peptide phospho correspondant aux résidus entourant la sérine 676 de la PRKCQ humaine, permettant la détection spécifique de la forme phosphorylée. La sérine 676 est un site de phosphorylation critique impliqué dans l'activation de PRKCQ et la signalisation en aval.
• Les modifications post-traductionnelles de PRKCQ comprennent la phosphorylation, l'ubiquitination et la formation de liaisons isopeptidiques, comme indiqué par les mots-clés Phosphoprotéine, Liaison isopeptidique et Conjugaison Ubl. La protéine possède également des domaines à doigt de zinc, une activité de liaison à l'ATP et une activité kinase.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour les applications de Western blot, incluez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour préserver l'état de phosphorylation de PRKCQ au niveau de Ser-676.
• La nature phospho-spécifique de l'anticorps nécessite une validation minutieuse ; envisagez d'utiliser un contrôle de blocage par peptide non phosphorylé ou un traitement par phosphatase pour confirmer la spécificité.
• En ELISA, l'adsorption avec des peptides phosphorylés versus non phosphorylés peut aider à évaluer la sélectivité de l'anticorps.
• En tant qu'anticorps polyclonal de lapin, la détection nécessite un conjugué secondaire anti-IgG de lapin ; optimisez les dilutions des anticorps primaire et secondaire de manière empirique pour chaque essai.
• Étant donné le poids moléculaire de 82 kDa de PRKCQ, choisissez des pourcentages de gel et des conditions de transfert appropriés pour assurer une résolution et une détection efficaces.

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