Ac mAb de lapin anti Phospho-POLR2A CTD-S5 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P24928

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de POLR2A (RPB1)

• POLR2A code pour la sous-unité RPB1 de l'ARN polymérase II dirigée par l'ADN, la plus grande sous-unité catalytique de Pol II, également connue sous le nom de RPB1, hRPB220 et POLR2 (UniProt P24928).
• En tant que composant catalytique central de Pol II, RPB1 synthétise les précurseurs d'ARNm et les ARN non codants au cours du cycle de transcription d'initiation, d'élongation et de terminaison. Références connexes : PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:30190596 PMID:28108474
• Le domaine C-terminal (CTD) est constitué de 52 répétitions d'heptapeptides et subit une phosphorylation dynamique : la phosphorylation de la Ser5 favorise l'évasion du promoteur, tandis que la phosphorylation de la Ser2 permet la libération de la pause et l'élongation. Références connexes : PMID:24207025 PMID:26124092
• RPB1 se localise principalement dans le noyau, avec une présence supplémentaire dans le cytoplasme et sur les chromosomes pendant la transcription.
• Les modifications post-traductionnelles du CTD comprennent l'acétylation, la méthylation et l'ubiquitination, qui modulent l'initiation et l'élongation de la transcription, en particulier des gènes induits par les facteurs de croissance.
• RPB1 possède également une activité ARN polymérase ARN-dépendante, impliquée dans l'extension des ARN non codants et les interactions hôte-virus, telles que la réplication du virus de l'hépatite delta.
• Les mutations de POLR2A sont liées à des troubles du neurodéveloppement et à une déficience intellectuelle (mot-clé UniProt : Déficience intellectuelle, Variante de la maladie).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phospho-peptide synthétique correspondant aux résidus entourant la Ser5 du CTD de POLR2A, garantissant une spécificité pour la forme phosphorylée. Validez la spécificité de l'anticorps en utilisant un traitement à la phosphatase ou un blocage avec un peptide non phosphorylé dans votre système d'essai.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande à environ 217 kDa ; envisagez d'utiliser un pourcentage de gel approprié et des conditions de transfert adaptées aux protéines de poids moléculaire élevé.
• L'anticorps est validé pour IHC-P et IF/ICC ; optimisez les conditions de récupération de l'antigène et de perméabilisation en fonction du type de tissu ou de cellule.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat suggère des séquences conservées chez ces espèces ; confirmez l'adéquation dans votre modèle expérimental.

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