Anticorps monoclonal de lapin Phospho-POLR2A CTD-S2 - P24928

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de POLR2A

• POLR2A code pour la plus grande sous-unité de l'ARN polymérase II, qui catalyse la transcription des précurseurs d'ARNm et de nombreux ARN non codants.
• Forme le centre actif avec POLR2B, coordonnant les ions Mg2+ pour l'addition de nucléotides et la relecture via l'activité exonucléase 3'->5'. Références associées : PMID:30190596 PMID:8381534
• Contient un domaine C-terminal (CTD) unique avec 52 répétitions de l'heptapeptide (YSPTSPS) qui sert de plateforme pour les facteurs régulant l'initiation, l'élongation et la terminaison de la transcription.
• La phosphorylation du CTD sur Ser5 favorise l'échappement du promoteur, tandis que la phosphorylation de Ser2 est nécessaire pour la levée de pause et le traitement des pré-ARNm. Références associées : PMID:26124092
• L'acétylation et la méthylation des lysines du CTD régulent l'expression génique, la méthylation ayant un effet répresseur.
• Présente une activité ARN polymérase ARN-dépendante, prolongeant les ARN non codants à l'extrémité 3'.
• La localisation subcellulaire inclut le noyau, le cytoplasme et les chromosomes.
• Mots-clés pertinents : phosphoprotéine, acétylation, méthylation, ADN polymérase ARN-dirigée, transcription, hydrolase.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps phospho-spécifique reconnaît POLR2A uniquement lorsque la Ser2 du motif répété du CTD est phosphorylée. Incluez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse et de lavage pour préserver le signal de phosphorylation.
• Pour l'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) et le CUT&Tag, envisagez de titrer l'anticorps et d'optimiser les conditions de réticulation/sonication pour vos loci cibles spécifiques.
• L'anticorps est adapté au Western blot (217 kDa), à l'immunofluorescence et à l'immunohistochimie ; validez-le dans le système d'échantillon pertinent en utilisant des contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple, cellules non traitées vs traitées avec un inhibiteur de kinase).
• En raison du poids moléculaire élevé, utilisez un gel SDS-PAGE à faible pourcentage ou prolongez les temps de transfert pour le WB.

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