Anticorps polyclonal de lapin Phospho-PLN-S16/T17 pour WB, ELISA - P26678

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du phospholambane

• Le phospholambane (PLN) est un régulateur clé de la contractilité du muscle cardiaque, codé par le gène PLN, avec un poids moléculaire d'environ 6 kDa (UniProt : P26678).
• Il inhibe de manière réversible la sarco/endoplasmic reticulum Ca2+-ATPase 2 (SERCA2/ATP2A2) dans le réticulum sarcoplasmique cardiaque, réduisant l'affinité apparente de la pompe pour le Ca2+, notamment pendant la diastole. Références associées : PMID:28890335
• La phosphorylation de PLN sur Ser16 et Thr17 soulage l'inhibition de SERCA2, favorisant la recapture du Ca2+ dans le réticulum sarcoplasmique et accélérant la relaxation musculaire.
• Au niveau sous-cellulaire, PLN se localise sur le réticulum endoplasmique, le réticulum sarcoplasmique et les membranes mitochondriales, ce qui est cohérent avec son rôle dans la gestion du calcium intracellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation (sur Ser16/Thr17), l'acétylation et la palmitoylation, qui modulent son activité et son association à la membrane.
• PLN est principalement exprimé dans le muscle cardiaque, mais il joue également un rôle dans les spermatides allongées et dans le noyau réticulaire thalamique du cerveau, influençant respectivement la différenciation des cellules germinales et les cycles de sommeil.
• Les mutations du gène PLN sont associées à des cardiomyopathies (CMD1P, CMH18), ce qui met en évidence son rôle essentiel dans la fonction cardiaque.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène étant un phosphopeptide synthétique couvrant Ser16 et Thr17, on s'attend à ce que l'anticorps reconnaisse spécifiquement la forme doublement phosphorylée de PLN ; validez la spécificité à l'aide de contrôles déphosphorylés ou d'un traitement à la phosphatase dans les systèmes d'échantillons appropriés.
• Pour l'analyse par Western blot, utilisez des marqueurs de faible poids moléculaire et envisagez des gels Tris-Tricine 15-20% pour séparer la bande de PLN de 6 kDa ; ajoutez des inhibiteurs de phosphatase pendant la préparation de l'échantillon pour préserver la phosphorylation.
• Pour l'ELISA, le revêtement avec des conjugués de phosphopeptides et l'utilisation de peptides compétitifs ou bloquants peuvent aider à confirmer la spécificité phosphorylée.
• Optimisez la dilution de l'anticorps de manière empirique pour chaque application ; l'inclusion de contrôles positifs et négatifs appropriés est recommandée pour confirmer la réactivité dépendante de la phosphorylation.

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