pAb de lapin Phospho-PLC gamma 1 (PLCG1)-Y783 pour WB, ELISA - P19174

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Phospho-PLC gamma 1 (PLCG1)-Y783

• PLCG1 code pour la 1-phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate phosphodiestérase gamma-1, une enzyme clé de la signalisation des phosphoinositides. Elle hydrolyse le PIP2 pour générer les seconds messagers DAG et IP3, qui mobilisent le calcium et activent la protéine kinase C.
• Elle est activée en aval des récepteurs tyrosine kinases (par exemple PDGFRA, PDGFRB, EGFR, FGFR), jouant un rôle critique dans la transduction des signaux des facteurs de croissance vers les voies intracellulaires.
• PLCG1 participe à la réorganisation de l'actine et à la migration cellulaire, comme l'a montré son besoin pour une chimiotaxie efficace (PubMed:17229814). Références associées : PMID:17229814
• La protéine se localise dans les lamellipodes et les ruches membranaires, des structures dynamiques au bord avant des cellules migrantes, ce qui souligne son rôle dans la régulation du cytosquelette.
• PLCG1 contient des domaines SH2 et SH3 qui médient les interactions avec les résidus tyrosine phosphorylés sur les récepteurs activés, et elle est elle-même phosphorylée sur des résidus tyrosine clés (dont Y783) pour une activation complète.
• Elle est soumise à diverses modifications post-traductionnelles, dont la phosphorylation et l'acétylation, et est classée comme phosphoprotéine, hydrolase et transducteur.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps est obtenu contre un peptide phosphorylé ; par conséquent, il reconnaît spécifiquement la PLCG1 phosphorylée sur Y783. Pour les témoins négatifs, traitez les échantillons avec de la lambda phosphatase ou utilisez une compétition par peptide non phosphorylé pour confirmer la spécificité.
• En Western blot, le poids moléculaire prédit de la PLCG1 est d'environ 149 kDa. Assurez une séparation adéquate des protéines de haut poids moléculaire en utilisant un pourcentage de gel approprié (par exemple 6-8% de SDS-PAGE) et des conditions de transfert adaptées.
• Pour ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme anticorps de détection dans un format ELISA sandwich phospho-spécifique. Validez-le dans votre système d'échantillon pertinent, par exemple des lysats cellulaires stimulés versus non stimulés.
• Lors de la détection de la phosphorylation endogène de PLCG1, envisagez de stimuler les cellules avec des facteurs de croissance (par exemple EGF, PDGF) connus pour activer les récepteurs tyrosine kinases qui phosphorylent PLCG1 sur Y783.
• Une réactivité croisée avec la souris est indiquée ; cependant, confirmez la réactivité dans votre modèle expérimental spécifique et validez l'anticorps pour d'autres espèces si nécessaire.
• Comme l'anticorps est un polyclonal de lapin, une variabilité d'un lot à l'autre peut survenir ; incluez des témoins appropriés et déterminez par titrage la concentration optimale.

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