Phospho-PKCδ/θ-S643/676 Lapin pAb - Q05655/Q04759

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine kinase C de type delta

• La protéine kinase C delta (PKCδ), codée par le gène PRKCD, est une sérine/thréonine-protéine kinase indépendante du calcium, dépendante des phospholipides et du diacylglycérol (DAG), appartenant à la sous-famille des PKC nouvelles. Elle est également connue sous le nom de nPKC-delta et possède une activité tyrosine-protéine kinase.
• PKCδ joue un double rôle dans l'apoptose : elle agit comme une protéine pro-apoptotique lors de l'apoptose induite par des dommages à l'ADN et comme une protéine anti-apoptotique lors de la mort cellulaire initiée par les récepteurs aux cytokines. Références associées : PMID:21406692, PMID:21810427
• Elle fonctionne comme un régulateur de la prolifération des lymphocytes B et est essentielle pour l'induction de la tolérance des lymphocytes B aux auto-antigènes.
• En réponse au stress oxydatif, PKCδ phosphoryle et active CHUK/IKKA dans le noyau, conduisant à la phosphorylation de p53/TP53 et à la signalisation apoptotique en aval. Références associées : PMID:21406692, PMID:21810427
• PKCδ présente des rôles contrastés dans le cancer : elle peut agir comme un suppresseur de tumeur lors d'une stimulation mitogénique, mais elle est fortement exprimée dans de nombreux cancers, favorisant la survie cellulaire et la chimiorésistance via des voies incluant NF-kappa-B, AKT1 et MAPK1/3. Références associées : PMID:15774464
• Elle est nécessaire à l'activité de la NADPH oxydase et à la production d'anions superoxydes dans les neutrophiles et les éosinophiles, impliquant la phosphorylation de NCF1 (p47-phox). Références associées : PMID:19801500, PMID:11748588
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, la région périnucléaire, le noyau, la membrane cellulaire, les mitochondries et le système endomembranaire, reflétant ses rôles dynamiques dans la signalisation.
• PKCδ contient des domaines caractéristiques de type doigt de zinc pour les esters de phorbol/DAG et est sujette à l'épissage alternatif, à la phosphorylation et à d'autres modifications post-traductionnelles qui régulent sa fonction et sa distribution subcellulaire.

Guide expérimental et conseils techniques

• Comme cet anticorps est produit contre un phosphopeptide synthétique correspondant à Ser643 de la PKCδ humaine (qui partage une homologie avec Ser676 de PKCθ), il est censé reconnaître spécifiquement les formes phosphorylées des deux kinases. Confirmez la réactivité croisée avec la cible pertinente dans votre système modèle.
• Pour le Western blot, les poids moléculaires prédits incluent 77 kDa et d'autres isoformes (67, 74, 80, 81 kDa) en raison de l'épissage alternatif et des modifications post-traductionnelles. Incluez des lysats traités à la phosphatase comme contrôle négatif pour vérifier la spécificité phospho.
• L'activation de PKCδ et sa phosphorylation sur Ser643 peuvent être stimulées par des esters de phorbol (par ex. PMA), un stress oxydatif (par ex. H2O2) ou des agents endommageant l'ADN. Pensez à des conditions de stimulation appropriées lors de la préparation des lysats cellulaires ou tissulaires.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la détection de phospho-PKCδ/θ dans des lysats cellulaires ou des protéines purifiées. Optimisez les conditions de coating et de détection selon les procédures standard.

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