Phospho-PKCalpha/beta II-T638/641 Lapin pAb pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P17252 / P05771

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la PKC alpha/bêta II

• La protéine kinase C de type alpha (PKC alpha) est une sérine/thréonine-protéine kinase dépendante du calcium, des phospholipides et du diacylglycérol, codée par le gène PRKCA. Elle joue un rôle central dans la régulation de la prolifération cellulaire, l'apoptose, la différenciation, la migration, l'adhésion, la tumorigenèse, l'hypertrophie cardiaque, l'angiogenèse, la fonction plaquettaire et l'inflammation.
• La PKC alpha se localise dans le cytoplasme, la membrane cellulaire, la membrane mitochondriale et le noyau, se transloquant dynamiquement vers des compartiments spécifiques lors de son activation pour exercer ses diverses fonctions.
• Lors de la migration des lymphocytes T CD4+ induite par les chimiokines, la PKC alpha phosphoryle le facteur d'échange de guanine CDC42, DOCK8, conduisant à sa dissociation de LRCH1 et à l'activation subséquente de la GTPase CDC42, favorisant ainsi la motilité cellulaire. Références associées : PMID:28028151
• En réponse à la signalisation de l'angiotensine II, la PKC alpha phosphoryle KLHL3 au niveau de la 'Ser-52', diminuant l'interaction entre KLHL3 et WNK4, ce qui module le transport ionique et la régulation de la pression artérielle. Références associées : PMID:25313067
• La PKC alpha phosphoryle et active LRRK1, qui à son tour phosphoryle les protéines RAB impliquées dans le trafic intracellulaire, mettant en lumière un rôle dans le transport vésiculaire. Références associées : PMID:36040231
• Elle est fortement exprimée dans divers cancers, y compris les gliomes et les cancers du sein, où elle agit comme un promoteur tumoral et est impliquée dans les phénotypes malins via la régulation de la prolifération cellulaire, de l'apoptose et de la migration.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour de la T638 de la PKCalpha/bêta II humaine. Pensez à valider l'anticorps dans votre système expérimental en traitant les cellules avec du PMA ou d'autres activateurs de PKC pour augmenter la phosphorylation au niveau T638/641 avant l'analyse.
• Pour le Western blot, utilisez des inhibiteurs de phosphatase appropriés lors de la préparation des échantillons pour préserver l'épitope phospho. Une bande autour de 76–77 kDa est attendue.
• En immunohistochimie (IHC-P), effectuez une récupération antigénique si nécessaire et incluez des inhibiteurs de phosphatase dans les étapes d'incubation pour maintenir les signaux de phosphorylation.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), surveillez la translocation de la PKC phosphorylée du cytoplasme vers la membrane lors de l'activation comme contrôle positif.
• En ELISA, validez la spécificité en utilisant à la fois des peptides phosphorylés et non phosphorylés pour confirmer la spécificité phospho.

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