Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-PKC (pan) (βII Ser660) pour WB, ELISA - P17252 / P05771 / Q05655 / Q02156 / P24723 / Q04759

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PKC (pan) (βII Ser660)

• La famille PKC comprend plusieurs isoformes de sérine/thréonine kinase (α, β, δ, ε, η, θ) qui régulent des processus cellulaires clés ; cet anticorps cible la forme phosphorylée de ces isoformes au niveau d'un site conservé correspondant à Ser660 dans PKC α (PRKCA).
• PKC α est activée par le calcium, les phospholipides et le diacylglycérol (DAG), et fonctionne dans la régulation positive et négative de la prolifération cellulaire, de l'apoptose et de la migration.
• Dans le cancer, PKC α agit comme un proto-oncogène, favorisant la croissance tumorale dans les gliomes et les cancers du sein, et exerce des effets anti-apoptotiques en phosphorylant BCL2 et en supprimant les voies médiées par p53.
• Dans le système immunitaire, PKC α régule la différenciation des macrophages et la migration des lymphocytes T CD4+ ; elle phosphoryle DOCK8 pour activer CDC42 (PubMed:28028151). Références associées : PMID:28028151
• PKC α circule entre le cytoplasme, la membrane plasmique, la membrane mitochondriale et le noyau, la localisation subcellulaire influençant l'accès à ses substrats et sa fonction.
• Dans le système cardiovasculaire, PKC α régule l'hypertrophie et la contractilité des cardiomyocytes via des voies impliquant ERK1/2 et la phosphorylation de la troponine T cardiaque (TNNT2).
• Les modifications post-traductionnelles clés comprennent l'autophosphorylation, la transphosphorylation et l'acétylation ; la phosphorylation au niveau Ser660 est un site régulateur critique pour une activité kinase complète.
• PKC α est également impliquée dans l'angiogenèse, l'agrégation plaquettaire et l'inflammation, soulignant ses rôles physiologiques diversifiés.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'anticorps a été produit contre un peptide phosphorylé ; utiliser des inhibiteurs de phosphatase pendant la préparation des échantillons pour préserver la phosphorylation. Confirmer la spécificité phospho en traitant les échantillons avec de la phosphatase lambda ou en utilisant des contrôles de blocage par peptide non phosphorylé.
• Pour le Western blot, optimiser les conditions de blocage (par ex., BSA au lieu du lait) pour réduire le bruit de fond. Commencer avec une dilution d'anticorps de 1:500 à 1:2000 et ajuster en fonction des résultats préliminaires.
• En tant qu'anticorps polyclonal, il peut reconnaître plusieurs isoformes de PKC dans la plage de poids moléculaire prédite ; envisager un siRNA ou des inhibiteurs spécifiques de l'isoforme pour confirmer l'identité si nécessaire.
• Pour l'ELISA, assurer la compatibilité des antigènes de revêtement et valider avec des contrôles positifs et négatifs connus.
• Avec une réactivité croisée pour la souris et le rat, cet anticorps est adapté aux modèles rongeurs ; vérifier la réactivité dans votre tissu ou lignée cellulaire spécifique avec des contrôles appropriés.

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