Phospho-PKA C-alpha (PRKACA)-T197 Lapin pAb - P17612

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la PKA C-alpha

• La sous-unité catalytique alpha de la protéine kinase dépendante de l'AMPc (PRKACA) est une kinase sérine/thréonine qui phosphoryle de nombreux substrats en réponse à l'AMPc, régulant des processus cellulaires clés incluant le métabolisme, la transcription et le cycle cellulaire (PubMed:15642694, PubMed:15905176, PubMed:16387847). Références associées : PMID:15642694 PMID:15905176 PMID:16387847
• La PRKACA se localise dans de multiples compartiments subcellulaires, y compris le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire, la mitochondrie et les cils, permettant une signalisation spatialement restreinte.
• Deux isoformes existent : l'isoforme 1 est exprimée de manière ubiquitaire, tandis que l'isoforme 2 est spécifique du sperme et enrichie dans les spermatocytes pachytènes, reflétant des fonctions tissulaires distinctes.
• La kinase est régulée par la dissociation médiée par l'AMPc des sous-unités régulatrices et par phosphorylation ; c'est une phosphoprotéine avec de multiples sites de modification.
• La PRKACA agit comme un inhibiteur clé de la voie de signalisation de smoothened en phosphorylant les facteurs de transcription GLI, empêchant leur activation transcriptionnelle en l'absence de ligands hedgehog (PubMed:16705181). Références associées : PMID:16705181
• Des mutations dans PRKACA sont associées au syndrome de Cushing, illustrant son rôle critique dans la régulation endocrine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique couvrant la région T197 ; en tant qu'anticorps phospho-spécifique, envisagez de valider la spécificité en utilisant des lysats traités à la phosphatase parallèlement à des contrôles positifs.
• Pour les applications WB, anticipez une bande unique d'environ 41 kDa ; incluez des inhibiteurs de phosphatase dans les tampons de lyse pour préserver la phosphorylation.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat est rapportée ; un alignement de séquences du motif T197 entre les espèces est conseillé pour confirmer la conservation de l'épitope.
• Les expériences ELISA peuvent bénéficier d'un enrobage avec le peptide phospho et de l'utilisation du peptide non phosphorylé comme contrôle négatif pour garantir la phospho-sélectivité.

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