Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-PI3KP85α/P55γ/P85β-Y467/Y464/Y199 pour WB - P27986 / O00459 / Q92569

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation des sous-unités régulatrices de la PI3K (p85α/p55γ/p85β)

• PIK3R1 code pour la sous-unité régulatrice alpha de la phosphatidylinositol 3-kinase, également connue sous le nom de PI3-kinase p85-alpha. Plusieurs isoformes existent par épissage alternatif, y compris l'isoforme 2 qui est exprimée dans le muscle squelettique et le cerveau.
• La sous-unité p85-alpha agit comme un adaptateur, se liant aux protéines tyrosine kinases activées (phosphorylées) via son domaine SH2, médiant l'association de la sous-unité catalytique p110 à la membrane plasmique.
• Elle est nécessaire pour la capture du glucose stimulée par l'insuline et la synthèse du glycogène dans les tissus sensibles à l'insuline, jouant un rôle clé dans la signalisation insulinique.
• Joue un rôle dans la signalisation en aval de divers récepteurs aux facteurs de croissance, y compris FGFR1-4, KIT, PDGFRA et PDGFRB, ainsi que dans la signalisation de l'intégrine ITGB2. Références associées : PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429
• Module la réponse cellulaire au stress du réticulum endoplasmique en favorisant la translocation nucléaire de l'isoforme 2 de XBP1, contribuant à l'amélioration de la tolérance au glucose sous surcharge métabolique dans le foie. Références associées : PMID:20348923
• Se localise principalement dans le cytoplasme, où elle interagit avec de multiples partenaires de signalisation.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation (sur des résidus tyrosine tels que Y467), l'acétylation et l'ubiquitination, régulant son activité et sa stabilité.
• La dérégulation des composants de la voie PI3K est impliquée dans le cancer, les troubles métaboliques et les maladies du développement comme le nanisme.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique phospho-spécifique correspondant aux résidus entourant la Y467 de PIK3R1/PIK3R2/PIK3R3 humain. En raison de la conservation de la séquence, l'anticorps présente une réactivité croisée avec les espèces souris et rat.
• Pour le Western blot, dénaturez les échantillons dans du tampon Laemmli et déposez 20 à 30 µg de protéines totales par puits. Les bandes détectées peuvent apparaître entre 42 et 54 kDa (p55γ/p85β) et 81-84 kDa (p85α), selon l'isoforme spécifique.
• Les anticorps spécifiques de la phosphorylation nécessitent une manipulation soigneuse : évitez les cycles répétés de congélation-décongélation et envisagez d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons pour préserver les signaux de phosphorylation.
• Incluez des contrôles positifs appropriés (par exemple, des lysats de cellules stimulées par l'insuline ou des facteurs de croissance) et des contrôles négatifs (blocage par un peptide non phosphorylé ou traitement à la phosphatase) pour confirmer la spécificité.

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