Phospho-PDK1/PDPK1-S241 pAb lapin - O15530

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PDK1 (protéine kinase 1 dépendante du 3-phosphoinositide)

• PDPK1 (PDK1) code pour une sérine/thréonine kinase exprimée de manière ubiquitaire, qui agit comme un régulateur majeur de la famille des kinases AGC, notamment PKB/AKT, p70 S6K, p90 RSK et les isoformes de PKC. Références associées : PMID:10226025 PMID:10480933 PMID:10995762

• Dans la signalisation insulinique, PDK1 phosphoryle et active AKT1 au niveau du Thr308, propageant des signaux en aval qui contrôlent l'absorption du glucose, la synthèse du glycogène et la survie cellulaire. Références associées : PMID:10226025 PMID:12167717 PMID:9094314

• PDK1 se localise dans le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire et les adhésions focales, permettant une signalisation diversifiée à partir de multiples compartiments cellulaires.

• La forme phosphorylée sur tyrosine de PDK1 est essentielle pour la dynamique des adhésions focales et elle est surexprimée dans les tissus malades du poumon, du foie, du côlon et du sein. Références associées : PMID:14585963

• PDK1 module d'autres voies de signalisation : elle régule négativement la signalisation TGF-bêta en phosphorylant les protéines SMAD et active NF-κB via la phosphorylation d'IKKB, influençant ainsi les réponses inflammatoires et immunitaires. Références associées : PMID:17327236 PMID:16207722

• PDK1 est essentielle pour la motilité et la chimiotaxie des cellules endothéliales vasculaires, et participe aux processus angiogéniques. Références associées : PMID:17371830

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Les anticorps phospho-spécifiques nécessitent une manipulation prudente des échantillons : ajoutez des inhibiteurs de phosphatases aux tampons de lyse et évitez une incubation prolongée des échantillons à température ambiante.
• Pour le Western blotting, traitez une partie de l'échantillon avec de la lambda phosphatase pour confirmer la spécificité phosphorylique de la bande d'environ 63 kDa.
• En immunofluorescence (IF/ICC), les conditions de fixation et de perméabilisation peuvent affecter l'accessibilité de l'épitope ; testez plusieurs méthodes de fixation (par exemple méthanol vs formaldéhyde) pour obtenir un signal optimal.
• Compte tenu de la réactivité croisée avec la souris et le rat, validez l'anticorps dans le modèle d'espèce prévu par alignement de séquence du site de phosphorylation et de la région antigénique.
• Les applications ELISA peuvent bénéficier de l'utilisation d'un peptide phosphorylé compétiteur pour garantir la spécificité du signal.

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