Phospho-PDGFR alpha-Y1018 Lapin pAb pour WB, ELISA - P16234

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du récepteur alpha du facteur de croissance dérivé des plaquettes

• Le récepteur alpha du facteur de croissance dérivé des plaquettes (PDGFRA, également connu sous le nom de CD140a ou PDGFR-2) est un récepteur tyrosine kinase de surface cellulaire appartenant à la famille des PDGFR. Il se lie aux ligands PDGFA, PDGFB et PDGFC, médiant des signaux essentiels pour la prolifération, la survie, la migration et la différenciation cellulaires.
• PDGFRA joue un rôle critique dans le développement embryonnaire, y compris la formation normale du squelette, la fermeture céphalique et le développement de la muqueuse gastro-intestinale et des villosités intestinales. Il est également nécessaire au recrutement des cellules mésenchymateuses.
• Dans la cicatrisation et l'activation plaquettaire, la signalisation via PDGFRA favorise la migration et le chimiotactisme cellulaires, et contribue à l'agrégation plaquettaire induite par la thrombine et à la sécrétion d'agonistes granulaires.
• Le récepteur se localise à la membrane cellulaire, ainsi qu'à des projections cellulaires telles que les cils et l'appareil de Golgi. Sa distribution subcellulaire est régulée par la liaison et l'activation du ligand.
• PDGFRA subit une autophosphorylation sur plusieurs résidus tyrosine, dont Y1018, ce qui crée des sites d'ancrage pour des molécules de signalisation en aval comme PLCG1, PIK3R1 et PTPN11, conduisant à l'activation des voies MAPK/ERK, PI3K/AKT et STAT.
• L'expression spécifique aux tissus est répandue ; détectée dans le cerveau, les fibroblastes, les muscles lisses, le cœur et les embryons, ainsi que dans les tumeurs coliques primaires et métastatiques. Elle est également retrouvée au niveau protéique dans les plaquettes.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, la glycosylation et l'ubiquitination, qui régulent l'activité, le trafic et la dégradation du récepteur.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à un peptide phosphorylé autour de la tyrosine 1018 (Y1018) dans le domaine intracellulaire du PDGFRA humain. Ce site est un site d'autophosphorylation connu, critique pour la signalisation en aval.
• L'anticorps est adapté aux applications de Western Blot (WB) et d'ELISA, comme indiqué. Pour le WB, envisagez d'utiliser des contrôles positifs appropriés (par exemple, des lysats de cellules stimulées où PDGFRA est phosphorylé) et validez la spécificité de la détection de la phosphorylation en comparant des échantillons traités et non traités.
• Étant donné que PDGFRA est un récepteur transmembranaire, des protocoles d'extraction des protéines membranaires peuvent améliorer la détection. Le poids moléculaire prédit est de 123 kDa ; envisagez d'utiliser des pourcentages de gel et des conditions de transfert appropriés pour les protéines de haut poids moléculaire.
• Pour l'ELISA, la spécificité phospho doit être confirmée en utilisant des peptides phosphorylés vs non phosphorylés ou via des expériences de traitement à la phosphatase.
• Notez que la réactivité croisée est rapportée pour l'humain ; la réactivité avec d'autres espèces doit être validée expérimentalement si nécessaire.

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