Anticorps polyclonal de lapin Phospho-p90Rsk/RSK1/RPS6KA1-T359/S363 pour WB, ELISA - Q15418

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RPS6KA1/RSK1

• Identité de la protéine : RPS6KA1 code pour la kinase ribosomale S6 alpha-1 de 90 kDa (RSK1/p90RSK), une sérine/thréonine kinase de la famille des p90RSK ; l'épissage alternatif génère plusieurs isoformes.
• Effecteur de la voie ERK-MAPK : Opère en aval d'ERK1/2 pour phosphoryler les facteurs de transcription CREB1, ETV1/ER81, NR4A1/NUR77 et le cofacteur CREBBP, favorisant l'expression des gènes à réponse immédiate et la mitogenèse.
  Références associées : PMID:18508509 PMID:18813292 PMID:12213813 PMID:16223362
• Initiation de la traduction : Améliore la traduction dépendante de la coiffe en phosphorylant RPS6 et EIF4B en réponse à l'insuline ou aux facteurs de croissance.
  Références associées : PMID:16763566 PMID:17360704
• Modulateur de la signalisation mTOR : Régule l'activité de mTORC1 et mTORC2 par phosphorylation de TSC2 et RPTOR, et agit en rétroaction via DEPTOR.
  Références associées : PMID:15342917 PMID:22017876
• Effets anti-apoptotiques : Inhibe les protéines pro-apoptotiques BAD et DAPK1 et favorise la survie des cellules stellaires hépatiques et des hépatocytes par phosphorylation de CEBPB.
  Références associées : PMID:10679322 PMID:16213824 PMID:11684016 PMID:18508509 PMID:18813292
• Migration cellulaire : Phosphoryle EPHA2 au niveau du Ser-897 pour contrôler la motilité cellulaire.
  Références associées : PMID:26158630
• Localisation subcellulaire et régulation : Navigue entre le noyau et le cytoplasme ; son activité kinase est contrôlée par une phosphorylation sur plusieurs sites, notamment les résidus Thr359 et Ser363 impliqués dans l'activation, reconnus par cet anticorps.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps phospho-spécifique a été obtenu contre un peptide synthétique portant les Thr359 et Ser363 phosphorylés. Pour le Western blot, confirmez sa spécificité en pré-incubant l'anticorps avec le peptide non phosphorylé ou en traitant les échantillons avec de la lambda phosphatase avant l'immunoblot.
• En WB, utilisez des tampons de blocage doux ou sans phosphate (par exemple, BSA ou lait écrémé sans inhibiteurs de phosphatase) pour préserver la reconnaissance de l'antigène. Optimisez empiriquement la dilution de l'anticorps primaire (généralement 1:500–1:2000) en fonction de votre type d'échantillon et de votre système de détection.
• Pour l'ELISA, revêtez la plaque avec le phosphopeptide ou l'extrait protéique et titrez l'anticorps pour obtenir un rapport signal/bruit optimal. Envisagez d'utiliser un peptide non phosphorylé comme contrôle négatif.
• Induisez la phosphorylation de RPS6KA1 dans les lignées cellulaires humaines en traitant avec de l'EGF (50 ng/mL) ou de l'insuline (100 nM) pendant 15 à 30 minutes avant la lyse, car RSK1 est fortement activée par la voie ERK.
• La réactivité croisée a été démontrée pour les échantillons humains ; pour d'autres espèces, vérifiez l'identité de la séquence de la région immunogène avant utilisation.

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