Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-p38 MAPK-T180/Y182 pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q15759/P53778/O15264/Q16539

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la p38 MAPK

• MAPK11 est une sérine/thréonine kinase et un membre de la famille des kinases p38 activées par les mitogènes (MAPK), également connue sous le nom de SAPK2b ou p38-2.
• Faisant partie de la voie de transduction du signal MAP kinase, elle répond à des stimuli extracellulaires tels que les cytokines pro-inflammatoires et le stress physique, conduisant à l'activation directe de facteurs de transcription. Références associées : PMID:12452429, PMID:20626350, PMID:35857590
• Les p38 MAPK phosphorylent un large éventail de cibles en aval, notamment les kinases MSK1/2, MK2/3 et MNK1/2, qui à leur tour régulent la transcription, la stabilité des ARNm et la traduction. Références associées : PMID:9687510, PMID:11154262
• Dans le noyau, les p38 MAPK phosphorylent des facteurs de transcription comme ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, PTPRH, DDIT3, p53, MEF2C et MEF2A pour moduler l'expression génique. Références associées : PMID:10330143, PMID:15356147, PMID:9430721
• La kinase régule également le remodelage de la chromatine en induisant la phosphorylation de l'histone H3 sur la 'Ser-10', renforçant le recrutement de NF-kappa-B sur les promoteurs des gènes inflammatoires.
• Au niveau subcellulaire, MAPK11 se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau.
• Son expression tissulaire est la plus élevée dans le cerveau et le cœur, avec une présence supplémentaire dans le placenta, les poumons, le foie, les muscles squelettiques, les reins et le pancréas.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation sur T180 et Y182 (critique pour l'activation), et la protéine est classée sous les mots-clés réponse au stress et régulation de la transcription.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène étant un peptide phosphorylé synthétique, l'anticorps reconnaît spécifiquement la forme activée, doublement phosphorylée de la p38 MAPK. Vérifiez la spécificité en comparant des lysats cellulaires traités versus non traités (par exemple, avec et sans inducteurs de stress).
• Pour le transfert Western (Western blotting), envisagez d'utiliser un gel SDS-PAGE à 10% et de charger 20–30 μg de lysat protéique. Plusieurs bandes peuvent être observées en raison de la détection de différents isoformes de p38 (poids prédits : 29, 34, 35 et 41 kDa). Incluez des marqueurs de poids moléculaire appropriés et un contrôle de charge.
• Dans les applications d'immunoprécipitation ou d'ELISA, confirmez la liaison phospho-spécifique dans des conditions non dénaturantes pour assurer l'accessibilité de l'épitope.
• Pour l'immunofluorescence (IF-P), utilisez une méthode de fixation qui préserve l'état de phosphorylation (par exemple, paraformaldéhyde à 4%) et perméabilisez avec du Triton X-100 à 0,1%.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), une récupération antigénique avec un tampon citrate (pH 6,0) peut être nécessaire. Titrez l'anticorps pour trouver la dilution optimale.
• Incluez toujours un contrôle négatif en pré-adsorbant l'anticorps avec le peptide phosphorylé, ou en utilisant un traitement à la phosphatase alcaline pour confirmer la spécificité phospho.

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