Phospho-p38 MAPK-T180 Anticorps pAb de lapin pour WB, IHC-P, ELISA - Q16539

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de p38 MAPK

• MAPK14 code pour la protéine kinase activée par des mitogènes p38 alpha, une sérine/thréonine kinase essentielle aux réponses cellulaires au stress, aux cytokines pro-inflammatoires et aux mitogènes.
• C'est l'un des quatre membres de la famille des p38 MAPK (alpha, bêta, gamma, delta) et est connu sous de nombreux alias, notamment CSBP, SAPK2A et MXI2.
• Après activation par double phosphorylation sur Thr-180 et Tyr-182, p38 alpha phosphoryle une large gamme de substrats, y compris les kinases en aval MAPKAPK2/MK2, RPS6KA5/MSK1 et MKNK1/MNK1, régulant ainsi l'expression génique, la stabilité de l'ARNm et la synthèse protéique. Références associées : PMID:9687510, PMID:9792677, PMID:11154262
• Dans le noyau, la p38 MAPK activée phosphoryle directement ou indirectement des facteurs de transcription tels que ATF1, ATF2, ELK1, p53/TP53 et MEF2C, modulant l'expression des gènes immédiats/précoces et les programmes transcriptionnels induits par le stress. Références associées : PMID:10330143, PMID:9430721, PMID:9858528
• La p38 MAPK joue également un rôle cytoplasmique dans la régulation du renouvellement protéique, l'endocytose et l'autophagie ; par exemple, elle phosphoryle SIAH2 et module le trafic d'ATG9. Références associées : PMID:17003045, PMID:19893488
• L'épissage alternatif donne les isoformes MXI2 (activé par les mitogènes / le stress oxydatif ; faible activité kinase sur ELK1 et ATF2) et EXIP (pro-apoptotique).
• Le fractionnement subcellulaire révèle la présence de p38 MAPK à la fois dans le cytoplasme et le noyau, ce qui est cohérent avec ses doubles rôles dans la signalisation et la transcription.
• La p38 MAPK est exprimée dans la plupart des tissus, avec les niveaux les plus élevés dans le cerveau, le cœur, le placenta, le pancréas et le muscle squelettique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Étant donné que l'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour du Thr-180 de MAPK14 humain, on peut s'attendre à ce que cet anticorps reconnaisse spécifiquement la forme phosphorylée et active de p38 MAPK. Pour une détection optimale, assurez-vous que les échantillons sont préparés dans des conditions qui préservent la phosphorylation des protéines (par exemple, utilisez des inhibiteurs de phosphatases et évitez les incubations prolongées à température ambiante).
• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser une méthode d'enrichissement des protéines à faible abondance si la phosphorylation endogène de p38 est faible ; le poids moléculaire prédit est d'environ 41 kDa.
• En immunohistochimie (IHC-P), le récupération d'antigène et la dilution de l'anticorps doivent être déterminées empiriquement ; un signal spécifique de la phosphorylation peut être validé en prétraitant les coupes de tissus avec de la lambda phosphatase.
• Pour les applications ELISA, utilisez si possible un standard de p38 phosphorylé recombinant, et confirmez la linéarité et la spécificité à l'aide de contrôles de peptides non phosphorylés.
• Une réactivité croisée a été observée chez l'homme, la souris et le rat, mais une validation dans votre système expérimental spécifique est recommandée.

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