Phospho-NF2-S518 Lapin pAb - P35240

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NF2

• NF2 code pour Merlin (protéine de type moesine-ezrine-radixine), également connu sous le nom de Schwannomin, un membre de la famille des protéines ERM (ezrine/radixine/moesine) qui relie le cytosquelette d'actine aux protéines membranaires.
• Merlin fonctionne comme un suppresseur de tumeurs en régulant la voie de signalisation Hippo/SWH ; il favorise la phosphorylation des kinases LATS1/2 pour restreindre la prolifération cellulaire et induire l'apoptose.
• Il peut stabiliser la membrane cellulaire et inhiber la signalisation de la kinase PI3 en se liant à AGAP2 et en entravant son activité stimulatrice.
• Merlin supprime la tumorigenèse en inhibant le complexe ligase E3 d'ubiquitination des protéines CUL4A-RBX1-DDB1-VprBP/DCAF1, empêchant la dégradation des facteurs pro-apoptotiques.
• Au niveau subcellulaire, Merlin se localise à la membrane plasmique au niveau des filopodes et des replis, ainsi que dans le cytoplasme, la région périnucléaire, les granules cytoplasmiques, le noyau et le cytosquelette, reflétant des rôles dynamiques dans l'inhibition de contact.
• La protéine est largement exprimée ; plusieurs isoformes existent, les isoformes 1 et 3 prédominant, et d'autres montrant des modèles spécifiques aux tissus (par exemple, rétine, tissus fœtaux).
• Une modification post-traductionnelle clé comprend la phosphorylation sur la Ser518, qui module sa conformation et son activité de suppresseur de tumeurs, comme le reflète le mot-clé UniProt « phosphoprotéine ».
• Merlin est associé à la maladie neurofibromatose de type 2 (NF2), et les mutations de ce gène provoquent la surdité ; il est répertorié comme membre du protéome de référence et suppresseur de tumeurs.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été élevé contre un peptide phosphorylé autour de la sérine 518 ; il est censé reconnaître spécifiquement la forme phosphorylée de NF2/Merlin. Incluez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour préserver la phosphorylation.
• Pour le western blot, une bande d'environ 70 kDa devrait être observée. Pour confirmer la spécificité phospho, envisagez de traiter les échantillons avec la phosphatase lambda ou d'utiliser un contrôle de compétition par peptide non phosphorylé.
• En immunohistochimie (IHC-P), validez l'anticorps sur des coupes de tissus connues pour exprimer Merlin phosphorylé, telles que le schwannome humain ou les tissus cérébraux normaux, et incluez un contrôle d'isotype.
• Les applications ELISA peuvent être effectuées en utilisant le peptide phosphorylé comme antigène de revêtement ; un peptide non phosphorylé peut servir de témoin négatif.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat est rapportée ; cependant, en raison de la conservation de la séquence, vérifiez les performances dans le système d'échantillons pertinent de chaque espèce.

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