Anticorps monoclonal de lapin Phospho-NF-κB2-S866 pour WB, ELISA - Q00653

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NF-κB2 (p100/p52)

• NF-κB2 code pour la sous-unité p100, qui est traitée par protéolyse pour générer la sous-unité de liaison à l'ADN p52. p100 est la forme principale, tandis que p52 est la forme mineure, produite via l'activation non canonique de NF-κB.
• Le complexe NF-κB est un facteur de transcription homodimère ou hétérodimère qui régule l'inflammation, l'immunité, la croissance cellulaire et l'apoptose. p52 forme des hétérodimères avec RelB pour activer la transcription ou des homodimères pour réprimer la transcription.
• Dans la voie non canonique, la phosphorylation de p100 sur S866 (et d'autres résidus) déclenche un traitement dépendant de l'ubiquitine en p52, permettant la translocation nucléaire et l'activation des gènes cibles.
• NF-κB2 se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau ; p100 retient principalement les protéines NF-κB associées dans le cytoplasme, tandis que les dimères p52 entrent dans le noyau après stimulation.
• p52 se lie à la séquence consensus d'ADN κB 5'-GGRNNYYCC-3' dans les amplificateurs des gènes de réponse immunitaire et de phase aiguë.
• De concert avec RELB, NF-κB2 régule l'horloge circadienne en réprimant l'activité activatrice transcriptionnelle de l'hétérodimère CLOCK-BMAL1.
• La protéine est une phosphoprotéine avec de multiples modifications ; des mutations dans NFKB2 sont associées à l'immunodéficience variable commune (CVID10).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été produit contre un phosphopeptide synthétique correspondant à S866 de la p100 humaine, et reconnaît donc NF-κB2 uniquement lorsqu'il est phosphorylé sur ce résidu.
• Pour le western blot, vérifiez la détection d'une bande d'environ 97 kDa (p100) et éventuellement d'une bande d'environ 52 kDa (p52) dans des lysats de cellules stimulées pour activer la voie NF-κB non canonique (par exemple, avec la lymphotoxine β ou des anticorps anti-LTβR).
• Étant donné que l'anticorps réagit de manière croisée avec la NF-κB2 de souris, il peut être adapté à des études dans des modèles murins ; cependant, validez-le dans le type de tissu ou de cellule pertinent.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser l'anticorps comme réactif de capture ou de détection avec des contrôles appropriés pour garantir la spécificité phospho.

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