Phospho-NF-kB p65/RelA-T505 Lapin pAb - Q04206

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NF-kB p65/RelA

• NF-kB p65/RelA est une sous-unité du complexe facteur de transcription NF-kB, un régulateur pléiotrope activé par divers stimuli pour contrôler les gènes impliqués dans l'inflammation, l'immunité, la croissance cellulaire, la différenciation, la tumorigenèse et l'apoptose.
• Le complexe NF-kB actif peut être un homo- ou hétérodimère de protéines de la famille Rel ; l'hétérodimère RELA-p50 est la forme la plus abondante, se liant aux sites k-B dans l'ADN cible et agissant comme un activateur transcriptionnel.
• Les autres membres de la famille Rel incluent RELB, NFKB1 (p105/p50), NFKB2 (p52) et c-REL, les différentes combinaisons de dimères conférant spécificité et diversité fonctionnelle.
• Dans les cellules au repos, NF-kB est retenu dans le cytoplasme via l'interaction avec les protéines inhibitrices I-kB ; après stimulation, la phosphorylation et la dégradation d'I-kB libèrent NF-kB pour sa translocation nucléaire.
• RELA est essentiel pour l'expression des gènes de cytokines dans les lymphocytes T, une fonction clé de l'immunité adaptative. Références associées : PMID:15790681
• Lors de l'infection par le SARS-CoV-2, RELA sert de facteur de transcription critique régulant la réponse interféron. Références associées : PMID:33440148
• La protéine subit de nombreuses modifications post-traductionnelles (par ex. phosphorylation, acétylation, méthylation, ubiquitination) qui modulent son activité, sa stabilité et ses interactions.
• La localisation subcellulaire alterne entre le noyau et le cytoplasme, la phosphorylation à divers sites (y compris Thr505) influençant l'activité transcriptionnelle ou la dynamique du complexe.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique couvrant Thr505, donc la réactivité de l'anticorps dépend de la phosphorylation. Assurez-vous que les échantillons sont préparés avec des inhibiteurs de phosphatases pour préserver l'épitope phosphorylé.
• Pour le western blot, utilisez les protocoles SDS-PAGE et transfert standards ; la taille de bande attendue pour RELA phosphorylé est d'environ 60 kDa. Optimisez de manière empirique les conditions de blocage et de dilution de l'anticorps.
• En ELISA, un enrobage de plaque avec un peptide phosphorylé ou un lysat protéique peut être utilisé ; la réactivité croisée avec les formes non phosphorylées doit être évaluée dans le système expérimental.
• Cet anticorps est réactif avec les échantillons humains ; pour d'autres espèces, vérifier l'homologie de séquence autour de Thr505 avant utilisation.

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