Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-NF-κB p65/RelA (Ser468) pour WB, ELISA - Q04206

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NF-κB p65/RelA

• NF-κB p65 (également connu sous le nom de RelA, NFKB3) est une sous-unité du complexe facteur de transcription NF-κB, appartenant à la famille des protéines contenant le domaine d'homologie Rel, qui comprend RELA, RELB, REL, NFKB1/p105 et NFKB2/p52.
• L'hétérodimère canonique NF-κB RELA-NFKB1 se lie aux sites d'ADN κB pour activer les gènes impliqués dans l'inflammation, l'immunité, la croissance cellulaire, la différenciation et l'apoptose.
• p65/RelA forme à la fois des hétérodimères activateurs (par exemple, RELA-NFKB1) et des homodimères (RELA-RELA), ces derniers étant impliqués dans l'expression de l'IL-8 médiée par l'invasine.
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique dans un état inactif lié aux inhibiteurs IκB ; lors de l'activation, il se transloque vers le noyau pour réguler la transcription.
• p65 fait l'objet de modifications post-traductionnelles étendues, notamment la phosphorylation, l'acétylation, la méthylation, l'ubiquitination et la S-nitrosylation, qui modulent son activité et sa stabilité.
• La phosphorylation sur le résidu Ser468 (et d'autres résidus) est impliquée dans le réglage fin de l'activité transcriptionnelle et des interactions protéiques.
• RelA est essentiel pour l'expression des gènes des cytokines des cellules T. Références associées : PMID:15790681
• Agit comme un facteur de transcription clé dans la réponse interféron lors d'une infection par le SARS-CoV-2. Références associées : PMID:33440148

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps est produit contre un phosphopeptide synthétique autour du résidu Ser468 ; par conséquent, il reconnaît spécifiquement la forme phosphorylée de p65/RelA. Pour une détection précise, incluez des inhibiteurs de phosphatase dans les tampons de lyse et de lavage.
• Pour confirmer la phospho-spécificité, traitez les échantillons avec de la phosphatase lambda et comparez les signaux des bandes par WB ; une perte de signal indique une dépendance à la phosphorylation.
• Pour le WB, effectuez une SDS-PAGE dans des conditions réductrices et utilisez des contrôles appropriés (par exemple, lysats cellulaires non traités vs stimulés connus pour activer NF-κB).
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; validez le couplage avec un anticorps anti-p65 non phospho-spécifique pour un ELISA en sandwich.
• Considérez la réactivité croisée avec les échantillons de rat comme indiqué ; cependant, validez-la dans votre modèle expérimental spécifique.

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