Phospho-NF-kB p65/RelA-S536 Lapin pAb - Q04206

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NF-kB p65/RelA

• NF-kB p65/RelA est une sous-unité du complexe du facteur de transcription NF-kB, un régulateur pléiotrope présent dans presque tous les types cellulaires qui contrôle les gènes impliqués dans l'inflammation, l'immunité, la différenciation, la croissance cellulaire, la tumorigenèse et l'apoptose.
• La forme la plus abondante de NF-kB est l'hétérodimère RELA-NFKB1, qui se lie aux sites d'ADN kappa-B avec une affinité distincte ; différentes combinaisons de dimères agissent comme des activateurs ou des répresseurs transcriptionnels.
• Dans les cellules au repos, NF-kB est retenue dans le cytoplasme par les inhibiteurs IkB ; lors d'une stimulation, la phosphorylation et la dégradation d'IkB libèrent NF-kB, permettant sa translocation nucléaire et l'activation des gènes cibles.
• RELA subit de nombreuses modifications post-traductionnelles — notamment la phosphorylation, l'acétylation, la méthylation et l'ubiquitination — qui modulent son activité transcriptionnelle, sa stabilité et ses interactions protéiques. La phosphorylation sur la S536 dans le domaine de transactivation renforce la sortie transcriptionnelle.
• Essentiel pour l'expression des gènes de cytokines dans les cellules T, faisant le lien entre les réponses immunitaires innées et adaptatives. Références connexes : PMID:15790681
• Un facteur de transcription clé régulant la réponse aux interférons lors de l'infection par le SARS-CoV-2, soulignant son rôle dans l'immunité antivirale innée. Références connexes : PMID:33440148
• La localisation subcellulaire navette dynamiquement entre le noyau et le cytoplasme, régie par des signaux de localisation nucléaire et les interactions avec IkB.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Utilisez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse et d'incubation pour préserver l'épitope phospho-S536 et éviter la perte de signal.
• Incluez toujours un anticorps NF-kB p65 total comme témoin de chargement et de normalisation dans les expériences de western blot pour confirmer les modifications spécifiques à la phosphorylation.
• Pour l'IHC-P, optimisez la récupération de l'antigène et bloquez les peroxydases endogènes ; envisagez un traitement des sections avec une phosphatase pour vérifier la coloration spécifique au phospho-site.
• Dans les applications ELISA, déterminez empiriquement les dilutions optimales d'anticorps et les conditions de détection pour chaque format de test.

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