Phospho-MLKL-S441 Lapin pAb pour WB et ELISA - Q9D2Y4

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MLKL

• Fonction de pseudokinase et activation dans la nécroptose : MLKL est une pseudokinase dépourvue d'activité kinase intrinsèque et sert d'effecteur critique de la nécroptose induite par le TNF. Après phosphorylation par RIPK3, elle s'homotrimérise, se localise à la membrane plasmique et déclenche la mort cellulaire nécrotique via un influx calcique et des dommages membranaires. Références associées : PMID:23835476 PMID:24012422 PMID:24019532
• Voie de nécroptose nucléaire : MLKL médie également la nécroptose nucléaire en réponse à une infection virale, où la phosphorylation nucléaire de RIPK3 perturbe l'enveloppe nucléaire, libérant l'ADN dans le cytosol. Références associées : PMID:32200799 PMID:32296175
• Liaison aux phosphates d'inositol : La liaison à des phosphates d'inositol hautement phosphorylés (par exemple, InsP6) est essentielle à la fonction nécroptotique de MLKL.
• Localisation subcellulaire : MLKL se localise dans le cytoplasme, la membrane cellulaire et le noyau.
• Profil d'expression tissulaire : Fortement exprimée dans le thymus, le côlon, l'intestin, le foie, la rate et les poumons ; faiblement dans le cœur, le muscle squelettique et le rein ; non détectée dans le cerveau.
• Épissage alternatif : Le gène Mlkl subit un épissage alternatif, générant plusieurs isoformes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, induisez la nécroptose dans des lysats cellulaires ou tissulaires (par exemple, TNF + inhibiteur de caspase) pour enrichir la MLKL phosphorylée ; incluez des inhibiteurs de phosphatase pendant la préparation des échantillons et confirmez la bande à ~54 kDa.
• Pour l'ELISA, utilisez le peptide phosphorylé comme antigène de couverture et validez la spécificité avec une contrepartie non phosphorylée ; la réactivité croisée avec l'humain et le rat doit être vérifiée dans les systèmes d'échantillons pertinents.
• Envisagez des protocoles de validation phospho-spécifiques tels qu'un traitement à la phosphatase pour confirmer la spécificité du signal.

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