Ac mAb de lapin Phospho-MEK1/MEK2-S217/S221 pour WB, IP, ELISA - Q02750/P36507

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MEK1/MEK2

• Les protéines kinases à double spécificité MEK1 (MAP2K1) et MEK2 (MAP2K2) sont des composants essentiels de la cascade de signalisation MAPK/ERK, transmettant les signaux du RAS-RAF activé vers ERK1/2.
• Lors de l'activation, MEK1/2 catalysent la phosphorylation concomitante d'un résidu thréonine et tyrosine dans le motif Thr-Glu-Tyr d'ERK1 (MAPK3) et ERK2 (MAPK1), conduisant à leur activation.
• MEK1/2 sont activés par les kinases RAF (par exemple, RAF1) en aval de la stimulation des récepteurs des facteurs de croissance, cytokines et hormones, reliant les signaux extracellulaires aux réponses intracellulaires.
• MEK1 favorise également l'activation de BRAF en se liant aux protéines d'échafaudage KSR1 ou KSR2, libérant une interaction inhibitrice et facilitant la dimérisation de BRAF. Références connexes : PMID:29433126
• La voie MAPK/ERK régule divers processus biologiques, notamment la croissance cellulaire, l'adhésion, la survie et la différenciation, ainsi que la transcription, le métabolisme et les réarrangements du cytosquelette.
• MEK1 se localise dans le cytoplasme, le cytosquelette (centrosome, pôle du fuseau), le noyau et la membrane ; MEK2 présente une distribution similaire.
• MEK1 est largement exprimé, avec des niveaux extrêmement faibles dans le cerveau. MEK2 présente un motif d'expression large similaire.
• MEK1/2 sont des phosphoprotéines et des sérine/thréonine/tyrosine kinases ; la phosphorylation de MEK1 sur Ser217 et Ser221 est un événement clé d'activation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique ciblant la Ser217 et la Ser221 phosphorylées ; l'anticorps est censé reconnaître spécifiquement la forme active doublement phosphorylée de MEK1/2.
• Pour le western blot, MEK1/2 apparaissent sous forme de bandes autour de 40–44 kDa. Utilisez des témoins positifs appropriés (par exemple, des lysats cellulaires stimulés par EGF) et incluez des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons.
• Pour l'immunoprécipitation, un anticorps monoclonal de lapin offre une haute spécificité et une compatibilité avec les protocoles IP standard. Validez l'efficacité du pull-down avec les lectures de phospho-ERK1/2.
• Cet anticorps convient aux ELISA ; envisagez de revêtir avec le phosphopeptide ou d'utiliser un format sandwich pour détecter MEK1/2 phosphorylé dans les lysats cellulaires.

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