Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-MEK1-T292 pour WB et ELISA - Q02750

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MEK1

• MEK1 (MAP2K1), également connue sous le nom de PRKMK1, MKK1, est une protéine kinase à double spécificité activée par un mitogène de 43 kDa qui sert de kinase essentielle dans la cascade de transduction du signal RAS-RAF-MEK-ERK.
• Lors de son activation par RAF1, MEK1 phosphoryle à la fois un résidu thréonine et un résidu tyrosine au sein du motif Thr-Glu-Tyr d'ERK1 (MAPK3) et d'ERK2 (MAPK1), conduisant à leur activation et à des événements de signalisation en aval qui régulent la croissance cellulaire, l'adhésion, la survie, la différenciation, la transcription, le métabolisme et les réarrangements du cytosquelette.
• D'une manière dépendante de KSR1 ou KSR2, MEK1 active également BRAF en libérant des interactions intramoléculaires inhibitrices et en favorisant la dimérisation de BRAF. Références connexes : PMID:29433126
• MEK1 est impliquée dans l'export nucléaire du récepteur gamma activé par les proliférateurs de peroxysomes (PPARG) et participe à la régulation de la dynamique endosomale, y compris le traitement des lysosomes, le recyclage des endosomes par le compartiment de recyclage périnucléaire (PNRC) et la fragmentation de l'appareil de Golgi lors de la mitose.
• La protéine se localise dans plusieurs compartiments sous-cellulaires, notamment le cytoplasme, le cytosquelette (centrosome et corps du pôle du fuseau), le noyau et la membrane, ce qui est cohérent avec ses divers rôles fonctionnels.
• MEK1 est largement exprimée dans les tissus, avec des niveaux extrêmement faibles détectés dans le cerveau.
• Des modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation à la thréonine 292 (et d'autres sites), l'acétylation et l'épissage alternatif régulent son activité et ses interactions. Les mutations de MAP2K1 sont associées à des maladies telles que la cardiomyopathie, la dysplasie ectodermique et la déficience intellectuelle (troubles du spectre du syndrome de Noonan).

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique autour du T292 de la MEK1 humaine ; cet anticorps est conçu pour reconnaître spécifiquement la forme phosphorylée. Traitez les cellules avec des stimuli appropriés (par exemple, des facteurs de croissance) et incluez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour préserver la phosphorylation.
• Pour le Western blot, une bande autour de 43 kDa est attendue. Utilisez un gel SDS-PAGE réducteur et validez la détection avec des témoins positifs et négatifs (par exemple, lysats traités à la phosphatase ou blocage avec un non-phosphopeptide).
• Il a été démontré que l'anticorps fonctionne dans les applications WB et ELISA. Il détecte la MEK1 humaine et de rat. Envisagez d'optimiser la dilution de l'anticorps pour vos échantillons et votre système de détection spécifiques.
• Lors de l'évaluation de la dynamique de phosphorylation de MEK1, des expériences en fonction du temps et des inhibiteurs de voies (par exemple, des inhibiteurs de MEK) peuvent aider à confirmer la spécificité.

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