Anticorps Monoclonal Lapin Phospho-MEK1-T292 pour WB, ELISA - Q0272750

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de MEK1

• MEK1 (MAP2K1) est une protéine kinase à double spécificité essentielle pour la voie de signalisation MAPK/ERK, catalysant la phosphorylation des résidus thréonine et tyrosine dans ERK1/2 (MAPK3/1) pour propager les signaux en aval.
• Il fonctionne en aval de RAS et RAF1, transduisant les signaux des facteurs de croissance, cytokines et hormones pour contrôler la croissance cellulaire, l'adhésion, la survie et la différenciation.
• MEK1 favorise également l'activation de BRAF en s'associant aux protéines d'échafaudage KSR1 ou KSR2, un mécanisme qui soulage l'auto-inhibition et améliore la dimérisation. Références connexes : PMID:29433126
• La protéine se localise à plusieurs sites sous-cellulaires, y compris le cytoplasme, le centrosome, le pôle du fuseau, le noyau et la membrane, facilitant sa participation à divers contextes de signalisation et à la mitose.
• MEK1 est largement exprimé avec une très faible abondance dans le cerveau, ce qui est cohérent avec son rôle ubiquitaire dans la régulation des processus cellulaires fondamentaux.
• Les modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation (par exemple, à Thr292) et l'acétylation ajustent finement l'activité de MEK1, et des mutations sont associées à la cardiomyopathie, la dysplasie ectodermique et le handicap intellectuel.

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique correspondant aux résidus entourant le Thr292 de MEK1 humain (UniProt Q02750). Pour le Western blot, envisagez d'inclure des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse cellulaire pour maintenir les signaux dépendants de la phosphorylation.
• Dans ELISA, le revêtement de l'antigène avec le peptide phosphorylé peut nécessiter une optimisation du tampon de revêtement et des conditions de blocage pour assurer la spécificité phospho-spécifique.
• Compte tenu de la forte conservation de MEK1 chez l'humain, la souris et le rat, cet anticorps est censé détecter la forme phosphorylée chez les trois espèces ; cependant, la réactivité croisée doit être confirmée expérimentalement dans les espèces et types de tissus/cellules pertinents.
• Pour WB, le poids moléculaire prédit est d'environ 43 kDa. Validez la taille de la bande en utilisant des contrôles appropriés du site de phosphorylation (par exemple, traitement à la phosphatase lambda) pour confirmer la spécificité.
• En tant qu'anticorps phospho-spécifique, la cohérence d'un lot à l'autre est critique pour les applications quantitatives comme l'ELISA. Nous recommandons une titration et des tests parallèles avec des contrôles de peptides non phosphorylés pour minimiser la variabilité.

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