pAb de lapin Phospho-MDM2-S260 pour WB, ELISA - Q00987

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MDM2

• MDM2 est une ubiquitine-protéine ligase E3 qui cible principalement p53/TP53 pour l'ubiquitination et la dégradation protéasomale, inhibant l'arrêt du cycle cellulaire et l'apoptose médiés par p53. Références associées : PMID:29681526
• Elle ubiquitine également d'autres substrats, notamment IGF1R, SNAI1, DYRK2 et DCX, régulant des processus comme la dégradation des récepteurs, le développement neuronal et la migration cellulaire. Références associées : PMID:12821780, PMID:15053880, PMID:15195100
• MDM2 régule négativement NDUFS1, entraînant une diminution de la respiration mitochondriale, une augmentation du stress oxydatif et l'engagement de la voie mitochondriale de l'apoptose. Références associées : PMID:30879903
• Au niveau sous-cellulaire, MDM2 se trouve dans le noyau, le nucléoplasme, le cytoplasme et le nucléole, effectuant la navette entre les compartiments pour exercer ses fonctions diverses.
• MDM2 est une phosphoprotéine avec un domaine doigt de zinc de type RING ; la phosphorylation sur plusieurs sites, dont S260, peut moduler son activité, sa stabilité et ses interactions avec p53 et d'autres partenaires.
• Au niveau tissulaire, MDM2 est exprimée de manière ubiquitaire, mais certaines isoformes d'épissage (Mdm2-A à -G) sont observées dans divers cancers tout en étant absentes des tissus sains.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Utilisez des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons pour préserver la phosphorylation au niveau du S260.
• Pour le WB, envisagez un blocage avec un peptide non phosphorylé ou un traitement des échantillons avec de la phosphatase pour confirmer la spécificité vis-à-vis de la forme phosphorylée.
• Validez l'anticorps sur des lignées cellulaires ou des tissus humains présentant un statut d'expression et de phosphorylation connu de MDM2 (par exemple, des cellules cancéreuses avec p53 de type sauvage sous stress génotoxique).
• Pour l'ELISA, assurez-vous que le système de capture et de détection préserve l'épitope phosphorylé et évitez les incubations prolongées qui peuvent entraîner une déphosphorylation.

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