Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-MDM2-S166 pour IHC-P et ELISA - Q00987

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MDM2

• MDM2 est une ligase E3 d'ubiquitine-protéine qui médie l'ubiquitination de p53/TP53, conduisant à sa dégradation par le protéasome et à l'inhibition de l'arrêt du cycle cellulaire et de l'apoptose médiés par p53 et p73/TP73.
  Références associées :
  PMID:29681526
• Elle ubiquitine également et favorise la dégradation d'autres suppresseurs de tumeurs et protéines de signalisation, notamment RB1, DAXX, IGF1R et SNAI1.
  Références associées :
  PMID:12821780
  PMID:15053880
  PMID:15195100
• MDM2 régule négativement la respiration mitochondriale en se liant à NDUFS1, provoquant sa rétention cytoplasmique, une activité réduite du complexe I, un stress oxydatif et l'apoptose.
  Références associées :
  PMID:30879903
• Localisée principalement dans le noyau (nucléoplasme et nucléole) avec une distribution cytoplasmique supplémentaire.
• Exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus normaux ; des isoformes spécifiques au cancer (Mdm2-A à Mdm2-G) sont détectées dans une gamme de tumeurs malignes.
• La phosphorylation sur la sérine 166 et d'autres résidus régule l'activité de MDM2 et ses interactions protéine-protéine.
• Contient un domaine de type doigt de zinc RING et appartient à la famille des enzymes de conjugaison de l'ubiquitine, nécessitant du zinc pour sa fonction de ligase E3.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'anticorps a été produit contre un peptide synthétique phospho entourant la S166 ; il reconnaît spécifiquement la forme phosphorylée de MDM2. Validez le statut phosphorylé avec des contrôles de traitement à la phosphatase.
• Pour l'IHC-P, envisagez une récupération antigénique (par exemple, tampon citrate) et validez l'intensité de la coloration dans des échantillons de tissus connus pour présenter des niveaux élevés de phospho-MDM2 (par exemple, certaines tumeurs).
• Pour l'ELISA, optimisez les conditions de revêtement et la dilution de l'anticorps par titration en damier, et incluez des contrôles avec des peptides phosphorylés et non phosphorylés pour confirmer la spécificité.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat a été rapportée ; vérifiez le signal dans les échantillons des espèces concernées en utilisant des contrôles positifs et négatifs appropriés.

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