pAb lapin Phospho-MAP2K4-S257 pour Western Blot et ELISA - P45985

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MAP2K4

• Kinase protéique à double spécificité agissant comme composant essentiel de la voie de transduction du signal des MAP kinases.
• Composant essentiel de la voie de signalisation des protéines kinases activées par le stress / kinase JNK N-terminale de c-Jun (SAP/JNK) ; phosphoryle et active directement MAPK8/JNK1, MAPK9/JNK2 et MAPK10/JNK3.
• Avec MAP2K7/MKK7, c'est l'une des seules kinases connues pour activer directement les JNK ; MAP2K4 phosphoryle préférentiellement le résidu Tyr au sein du motif Thr-Pro-Tyr.
• Active en outre les p38 MAPK (MAPK11, MAPK12, MAPK13, MAPK14), contrairement à MAP2K7 qui cible exclusivement les JNK.
• Nécessaire pour le maintien de l'homéostasie lymphoïde périphérique.
• Participe à la signalisation de mort mitochondriale, favorisant la libération de cytochrome c et l'apoptose.
• Localisation subcellulaire : à la fois dans le cytoplasme et le noyau.
• Exprimé abondamment dans le muscle squelettique, avec une large distribution dans les autres tissus.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Confirmez la phospho-spécificité en traitant les échantillons avec de la lambda phosphatase ou en co-incubant avec un peptide bloqueur non phosphorylé.
• Incluez des lysats de contrôle positifs et négatifs appropriés (par exemple des cellules stimulées versus non stimulées) pour valider le signal phosphorylé en WB.
• Pour les échantillons de souris ou de rat, vérifiez la réactivité croisée et l'alignement de séquence au niveau du site de phosphorylation avant les dosages quantitatifs.
• Déterminez expérimentalement la dilution optimale de l'anticorps pour chaque application ; les dilutions initiales typiques sont indiquées dans la fiche technique de l'anticorps.
• En ELISA, assurez une cohérence dans le revêtement de la plaque et les réactifs de détection pour minimiser la variabilité de la quantification de la phosphorylation.

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