Anticorps polyclonal de lapin Phospho-MAP2K1-S217/MAP2K2-S221 pour WB, ELISA - Q02750 / P36507

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MAP2K1/MAP2K2 (MEK1/MEK2)

• MAP2K1 (MEK1) et MAP2K2 (MEK2) sont des protéines kinases à double spécificité qui constituent des composants essentiels de la voie de transduction du signal des MAP kinases, en particulier de la cascade MAPK/ERK.
• Après une stimulation extracellulaire, RAS active RAF1, qui phosphoryle et active à son tour MAP2K1/2 sur des résidus sérine conservés (S217 pour MEK1, S221 pour MEK2), déclenchant la phosphorylation en aval d'ERK1/2 sur un motif Thr-Glu-Tyr.
• ERK1/2 activé se transloque ensuite vers le noyau pour réguler les facteurs de transcription, contrôlant des processus tels que la croissance cellulaire, l'adhérence, la survie, la différenciation, le métabolisme et les réarrangements du cytosquelette.
• MAP2K1 participe également à l'activation de BRAF dépendante de KSR1/2 en favorisant la dimérisation KSR-BRAF, ce qui rompt les interactions inhibitrices et améliore l'activité kinase de BRAF. Références associées : PMID:29433126
• La cascade MAPK/ERK influence la dynamique endosomiale, le traitement lysosomal et la fragmentation de l'appareil de Golgi pendant la mitose, un effet médié en partie par la localisation subcellulaire de MAP2K1 dans le cytoplasme, le centrosome, le pôle du fuseau mitotique, le noyau et la membrane.
• MAP2K1 est largement exprimé dans tous les tissus humains mais présente des niveaux extrêmement bas dans le cerveau, ce qui est cohérent avec son rôle ubiquitaire dans la signalisation mitogène.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation sur les sites d'activation, l'acétylation et des mutations associées à des maladies liées à la cardiomyopathie, à la dysplasie ectodermique et à la déficience intellectuelle (selon les mots-clés UniProt).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique couvrant S217 de MAP2K1 et S221 de MAP2K2, ce qui indique que l'anticorps reconnaît préférentiellement les formes activées (phosphorylées) de MEK1/2.
• Pour le Western blot, préparez des lysats de cellules privées de sérum puis stimulées par des facteurs de croissance (par exemple EGF, insuline) pour induire une phosphorylation robuste de MEK1/2 ; validez la spécificité en comparant avec des anticorps totaux MEK1/2 ou en traitant les échantillons avec de la lambda phosphatase.
• Les poids moléculaires attendus sont d'environ 40–44 kDa pour MAP2K1 et d'environ 45 kDa pour MAP2K2 ; l'épissage alternatif peut générer des bandes supplémentaires.
• En ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection, mais la dilution optimale et l'appariement doivent être déterminés empiriquement dans le système d'essai final.

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