Phospho-LCK-Y394 Lapin pAb - P06239

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la LCK

• La LCK est une tyrosine-protéine kinase non réceptrice essentielle pour la sélection des cellules T, leur maturation dans le thymus et la fonction des cellules T matures.
  Références associées : PMID:2470098
• Lors de l'engagement du récepteur des cellules T (TCR) avec le complexe peptide-MHC, la LCK est recrutée vers le complexe TCR-CD3 et phosphoryle les résidus de tyrosine au sein des ITAM des chaînes CD3 et TCR, déclenchant le recrutement de ZAP70 et la production de lymphokines en aval.
  Références associées : PMID:2470098 PMID:40592325
• La LCK participe également à la signalisation via les récepteurs CD2 et IL2 : l'association avec CD2 entraîne une hyperphosphorylation de la LCK, et la liaison de l'IL2 renforce l'activité de la LCK pour promouvoir la prolifération des cellules T.
• Elle phosphoryle de multiples substrats, notamment RUNX3, PTK2B/PYK2, MAPT, RHOH et TYROBP, et interagit avec FYB2.
  Références associées : PMID:27335501
• Se localise à la membrane cellulaire, au cytoplasme et au cytosol.
• Exprimée spécifiquement dans les cellules lymphoïdes.
• Annotée avec des mots-clés tels que épissage alternatif, liaison à l'ATP, kinase, phosphoprotéine, proto-oncogène, domaines SH2 et SH3, et lipidation (myristate et palmitate), reflétant sa régulation multifactorielle.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique autour de la Tyr394, on s'attend donc à ce que l'anticorps reconnaisse spécifiquement la LCK phosphorylée sur ce site de la boucle d'activation.
• Pour le Western Blot (WB), utilisez des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver la phosphorylation. Une bande à environ 58 kDa est attendue dans les lysats de cellules lymphoïdes humaines et murines.
• Validez les performances de l'anticorps dans des modèles de cellules T appropriés (par exemple, cellules Jurkat) stimulés via CD3/CD28 pour induire une phosphorylation robuste de la Tyr394.
• L'IF/ICC peut nécessiter une optimisation de la fixation/perméabilisation ; envisagez des tests sur des cellules T activées ou des coupes de tissu thymique.

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