Phospho-JAK2-Y1007/1008 Anticorps monoclonal de lapin pour WB, ELISA - O60674

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de JAK2

• JAK2 est une tyrosine kinase protéique non transmembranaire qui phosphoryle les récepteurs de cytokines de type I (par ex., GHR, EPOR, MPL) et de type II (par ex., récepteurs de l'IFN, interleukines), initiant des cascades de signalisation en aval. Références associées : PMID:15690087 PMID:15899890 PMID:7615558
• Elle médie une signalisation essentielle dans l'immunité innée et adaptative, et est impliquée dans des processus tels que la croissance cellulaire, le développement, la différenciation et les modifications des histones.
• Lors de la liaison du ligand, JAK2 phosphoryle des résidus tyrosine spécifiques sur les queues cytoplasmiques des récepteurs, créant des sites d'amarrage pour les protéines STAT ; elle phosphoryle ensuite les STAT, qui se dimérisent et se transloquent vers le noyau pour réguler la transcription des gènes. Références associées : PMID:9618263
• Dans l'érythropoïèse, la stimulation par l'EPO conduit à l'autophosphorylation et à l'activation de JAK2, à son association avec l'EPOR, et à la phosphorylation et l'activation ultérieures de STAT5, qui favorise la transcription de gènes liés à l'érythropoïèse. Références associées : PMID:9657743
• Dans le noyau, JAK2 phosphoryle l'histone H3 au niveau de Tyr-41 (H3Y41ph), une modification qui exclut HP1α de la chromatine, jouant ainsi un rôle direct dans la régulation épigénétique. Références associées : PMID:19783980
• La localisation subcellulaire comprend le système endomembranaire, le cytoplasme et le noyau, ce qui est cohérent avec ses fonctions doubles de signalisation cytoplasmique et nucléaire.
• Exprimée de manière ubiquitaire dans la plupart des tissus, reflétant son rôle étendu dans la signalisation des cytokines.
• Les caractéristiques structurelles clés incluent un domaine SH2 et des domaines kinase en tandem ; classée comme tyrosine-protéine kinase, régulateur de la chromatine et proto-oncogène.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'anticorps a été produit contre un peptide phosphorylé synthétique couvrant Y1007 et Y1008 ; il est censé reconnaître spécifiquement JAK2 uniquement lorsqu'elle est phosphorylée au niveau de ces sites de la boucle d'activation.
• Pour le WB, envisagez d'utiliser des cocktails d'inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons et d'inclure des témoins positifs/négatifs appropriés (par ex., cellules stimulées vs non stimulées) pour confirmer la spécificité à la phosphorylation.
• Le poids moléculaire prédit de JAK2 est d'environ 131 kDa ; vérifiez la migration de la bande par rapport aux marqueurs de poids moléculaire et tenez compte des éventuelles modifications post-traductionnelles.
• Le prétraitement des lysats cellulaires avec de la phosphatase lambda peut servir de témoin utile pour déterminer la spécificité à la phosphorylation.
• Pour l'ELISA, suivez les protocoles standard d'immobilisation et de détection ; le couplage avec un anticorps anti-JAK2 total peut permettre la normalisation des niveaux de phosphorylation.

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