Anticorps polyclonal de lapin Phospho-IRS1-S312 pour Western Blot - P35568

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IRS1

• Le substrat 1 du récepteur de l'insuline (IRS1) est une protéine adaptatrice de signalisation critique qui médie la transduction du signal à partir du récepteur de l'insuline (INSR) et du récepteur du facteur de croissance analogue à l'insuline I (IGF1R), jouant des rôles essentiels dans le développement, la croissance, l'homéostasie du glucose et le métabolisme des lipides. Références associées : PMID:7541045, PMID:19639489
• Suite à sa phosphorylation par le récepteur de l'insuline activé, l'IRS1 sert de protéine d'ancrage/échafaudage, recrutant des protéines contenant un domaine SH2 telles que la sous-unité régulatrice p85 de la PI3K, NCK1, NCK2, GRB2 et SHP2 pour propager les signaux en aval. Références associées : PMID:11171109, PMID:8265614
• Le recrutement du complexe GRB2-SOS1 conduit à l'activation de la cascade Ras/Raf/MEK/MAPK, tandis que l'activation de la voie PI3K/AKT médie la plupart des effets métaboliques de l'insuline ; les deux voies coopèrent pour réguler l'expression des gènes, la croissance cellulaire et la différenciation.
• L'IRS1 agit également comme un régulateur positif de la voie de signalisation Wnt/β-caténine en supprimant la dégradation de DVL2 médiée par l'autophagie, favorisant ainsi la prolifération cellulaire. Références associées : PMID:24616100
• L'IRS1 se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la signalisation et la régulation génique.
• La protéine est soumise à de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'ubiquitination et la S-nitrosylation, qui régulent finement son activité et sa stabilité ; les mots-clés incluent Phosphoprotéine, Conjugaison Ubl et Diabète sucré.
• Les mutations ou la dérégulation de l'IRS1 sont associées à la résistance à l'insuline et au diabète de type 2, soulignant son importance dans les maladies métaboliques.
• L'IRS1 humain a un poids moléculaire calculé d'environ 131,6 kDa et migre à environ 132 kDa sur SDS-PAGE.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phospho-spécifique correspondant aux résidus entourant la sérine 312 de l'IRS1 humain. La spécificité pour la forme phosphorylée doit être confirmée ; envisagez d'utiliser des lysats traités à la phosphatase ou un blocage par peptide non phospho lors de votre validation.
• La détection de l'IRS1 par Western blot donne généralement une bande autour de 132 kDa ; utilisez des marqueurs de poids moléculaire appropriés et tenez compte du comportement de migration connu de la protéine.
• Pour l'IRS1 phosphorylée, le traitement des cellules avec de l'insuline ou de l'IGF-1 avant la lyse est censé augmenter le signal ; optimisez le temps de stimulation et la concentration pour votre système.
• Cet anticorps présente une réactivité croisée avec l'IRS1 de souris et de rat selon les données du fournisseur ; validez dans le système d'échantillon pertinent en utilisant des contrôles appropriés.
• Étant donné la sensibilité des épitopes phospho, évitez un décapage trop agressif et le re-sondage des membranes ; si nécessaire, vérifiez que le signal phospho n'est pas perdu.

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