Phospho-IRF3-S386 Lapin pAb pour WB et ELISA - Q14653

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IRF3

• Régulateur transcriptionnel clé des réponses immunitaires dépendantes des interférons de type I (IFN), contrôlant l'expression des IFN-α/β et des gènes stimulés par l'interféron (ISG) en se liant aux promoteurs des éléments de réponse stimulés par l'interféron (ISRE).
  Références associées : PMID:11846977, PMID:16846591, PMID:16979567, PMID:20049431

• Existe sous une forme monomérique inactive dans le cytoplasme des cellules non infectées ; lors d'une infection virale ou d'une signalisation par les TLR, les kinases IKBKE et TBK1 phosphorylent l'IRF3 sur des résidus clés, notamment le S386, induisant un changement conformationnel, une dimérisation et une translocation nucléaire.
  Références associées : PMID:22394562, PMID:25636800, PMID:27302953

• Dans le noyau, l'IRF3 phosphorylé s'associe à CREBBP pour former le complexe du facteur 1 activé par l'ARNdb (DRAF1), qui active puissamment la transcription des gènes de l'IFN de type I et des ISG.
  Références associées : PMID:16154084, PMID:33440148

• Joue un rôle critique dans les phases précoces et tardives de l'induction des gènes de l'IFN, et peut activer des programmes distincts d'expression génique dans les macrophages, notamment la capacité d'induire une apoptose significative dans les macrophages primaires.
  Références associées : PMID:16846591, PMID:25609812

• Facteur de transcription clé dans la réponse à l'IFN lors de l'infection par le SARS-CoV-2, assurant la médiation de la défense antivirale.
  Références associées : PMID:33440148

• La localisation subcellulaire navette entre le cytoplasme, le noyau et la mitochondrie ; le recrutement mitochondrial (via TOMM70:HSP90AA1) peut déclencher l'apoptose par l'intermédiaire de BAX.
  Références associées : PMID:25609812

• Exprimé de manière constitutive dans un large éventail de tissus ; le gène subit un épissage-alternatif et la protéine est sujette à l'acétylation, la phosphorylation et la conjugation de type ubiquitine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique correspondant au site de phosphorylation S386 ; nous recommandons l'utilisation d'inhibiteurs de phosphatases pendant la lyse des échantillons pour préserver le signal de phosphorylation.
• Pour le Western blot, une bande autour de 47 kDa est attendue ; incluez un témoin de blocage avec un peptide non phosphorylé pour confirmer la spécificité phospho-spécifique.
• Dans le cas de l'ELISA, un revêtement direct avec le phosphopeptide ou la capture de la cible à partir des lysats peut être utilisé ; une titration de l'anticorps est conseillée pour un rapport signal/bruit optimal.

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