Anticorps monoclonal de lapin Phospho-IRE1-S724 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75460

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'IRE1

• IRE1 (ERN1) est une enzyme bifonctionnelle associant un domaine kinase sérine/thréonine et un domaine endoribonucléase, agissant comme capteur principal du stress du réticulum endoplasmique (RE) et de la réponse aux protéines dépliées (UPR). Références associées : PMID:11175748, PMID:11779464, PMID:12637535
• Dans des conditions basales, les monomères d'IRE1 sont maintenus inactifs par liaison au chaperon du RE BiP/HSPA5. L'accumulation de protéines mal repliées déclenche la libération de BiP, permettant l'homodimérisation d'IRE1 et la trans-autophosphorylation. Références associées : PMID:21317875
• L'endoribonucléase IRE1 activée cible spécifiquement l'ARNm XBP1, en excisant un intron de 26 nucléotides pour produire XBP1 épissé (XBP1s). Références associées : PMID:11779464, PMID:21317875, PMID:24508390
• XBP1 épissé code pour un facteur de transcription puissant qui induit l'expression des gènes cibles de l'UPR, favorisant le repliement des protéines et la dégradation associée au RE. Références associées : PMID:11779464, PMID:21317875, PMID:24508390
• IRE1 médie également le trafic non conventionnel induit par le stress du RE, dépendant de GORASP2, du CFTR vers la membrane plasmique, impliquant une redistribution de SEC16A. Références associées : PMID:21884936, PMID:28067262
• Des études en immunofluorescence localisent IRE1 majoritairement à la membrane du réticulum endoplasmique.
• IRE1 est exprimé de manière ubiquitaire, avec des niveaux particulièrement élevés dans le tissu pancréatique.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour la détection phospho-spécifique en western blot, ajoutez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour préserver le signal de phosphorylation de Ser724.
• Utilisez un anticorps IRE1 non phosphorylé comme contrôle de charge pour normaliser les niveaux de protéine phosphorylée et totale.
• Le poids moléculaire prédit est d'environ 110 kDa ; utilisez des marqueurs de poids moléculaire adaptés pour une confirmation précise de la taille.
• Pour IHC-P et IF/ICC, les conditions de récupération d'antigène et de perméabilisation peuvent nécessiter une optimisation selon les types d'échantillons.
• Bien que l'anticorps soit destiné à WB, IHC-P, IF/ICC et ELISA, les dilutions optimales et les temps d'incubation doivent être déterminés expérimentalement dans votre système modèle.

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