pAb de lapin anti-Phospho-INSR-Y1146/IGF1R-Y1131 pour WB, ELISA - P06213 / P08069

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'INSR et d'IGF1R

• Le récepteur de l'insuline (INSR) est un récepteur tyrosine kinase qui médie les actions pléiotropiques de l'insuline après liaison du ligand.
• Une fois activé, l'INSR phosphoryle des substrats intracellulaires (IRS1-4, SHC), conduisant à l'activation de deux voies de signalisation majeures : PI3K-AKT (actions métaboliques) et Ras-MAPK (croissance et différenciation cellulaire).
• La voie PI3K-AKT promeut la translocation du transporteur de glucose SLC2A4/GLUT4, exerce des effets anti-apoptotiques (via la phosphorylation de BAD) et active la signalisation mTORC1 ; la voie Ras-MAPK régule l'expression génique et coopère avec la voie PI3K pour la croissance cellulaire.
• L'INSR forme des récepteurs hybrides avec l'IGF1R. Les récepteurs hybrides contenant l'isoforme longue d'INSR sont activés avec une haute affinité par l'IGF1, une faible affinité par l'IGF2, et pas de manière significative par l'insuline (PubMed:12138094) ; ceux contenant l'isoforme courte sont activés par l'IGF1, l'IGF2 et l'insuline. Une autre étude suggère des caractéristiques de liaison similaires pour les deux types de récepteurs hybrides (PubMed:16831875). Références associées : PMID:12138094 PMID:16831875
• La localisation subcellulaire inclut la membrane cellulaire, les endosomes tardifs et les lysosomes, ce qui reflète l'internalisation et le trafic du récepteur.
• L'isoforme longue et l'isoforme courte sont exprimées majoritairement dans les tissus cibles de l'insuline (foie, tissu adipeux, muscle squelettique) et sont également présentes dans de nombreux autres tissus et tumeurs ; l'isoforme courte est exprimée préférentiellement dans les cellules fœtales.
• L'INSR subit une autophosphorylation sur plusieurs résidus tyrosine, dont Y1146, qui est critique pour la propagation du signal en aval.
• Les caractéristiques structurales clés incluent l'épissage alternatif, des domaines extracellulaires de liaison au ligand, une hélice transmembranaire et un domaine tyrosine kinase intracellulaire.

Conseils expérimentaux et techniques

• Pour la détection spécifique des phosphorylations, ajoutez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse et validez la spécificité en traitant les échantillons avec de la phosphatase alcaline ou en utilisant la compétition par peptide non phosphorylé.
• Utilisez des contrôles positifs appropriés, comme des lignées cellulaires stimulées par l'insuline, et recherchez des bandes autour de 155 kDa en Western blot.
• Pour l'ELISA, optimisez les conditions de revêtement et confirmez la linéarité du test avec des standards de peptide phosphorylé.
• Tenez compte du fait que l'anticorps peut reconnaître à la fois les formes phosphorylées d'INSR et d'IGF1R ; vérifiez l'identité de la cible dans votre système expérimental.

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