Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-IκBα-S36 pour WB, IHC-P, ELISA - P25963

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IκBα

• L'IκBα (inhibiteur alpha du NF-kappa-B, également connu sous le nom de MAD3 ou NFKBI) est une protéine régulatrice clé qui inhibe les facteurs de transcription NF-κB en retenant les dimères RELA/p65 et NFKB1/p50 dans le cytoplasme en masquant leurs signaux de localisation nucléaire. Références associées : PMID:1493333 PMID:36651806 PMID:7479976

• Lors de la stimulation cellulaire par des signaux immunitaires et pro-inflammatoires, l'IκBα subit une phosphorylation aux résidus Ser32 et Ser36, ce qui déclenche son ubiquitination et sa dégradation protéasomale ultérieure, libérant ainsi les dimères NF-κB pour qu'ils migrent vers le noyau et activent la transcription. Références associées : PMID:7479976 PMID:7628694 PMID:7796813

• L'IκBα est un membre de la famille des inhibiteurs IκB, caractérisé par des répétitions d'ankyrine qui assurent les interactions protéine-protéine avec les dimères NF-κB.

• Au niveau subcellulaire, l'IκBα navigue entre le cytoplasme et le noyau, mais sa localisation prédominante est cytoplasmique, où il séquestre les complexes NF-κB inactifs.

• Les modifications post-traductionnelles de l'IκBα incluent la phosphorylation, l'ubiquitination (conjugaison Ubl), l'hydroxylation et la formation de liaisons isopeptidiques, qui régulent sa stabilité et son activité.

• Le gène NFKBIA est associé à la dysplasie ectodermique et à d'autres troubles liés au système immunitaire lorsqu'il est muté, soulignant son rôle critique dans l'homéostasie immunitaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour de la Ser36, garantissant une spécificité élevée pour la forme phosphorylée. Un blocage par peptide non phosphorylé peut être utilisé pour confirmer la phospho-spécificité en WB.
• Pour le WB, envisagez de stimuler les cellules (par exemple avec du TNF-α ou de l'IL-1β) pour induire la phosphorylation et la dégradation de l'IκBα, qui peuvent être suivies avec cet anticorps.
• En IHC-P, les protocoles de récupération d'antigène et de perméabilisation doivent être optimisés ; validez le marquage sur des coupes tissulaires connues pour exprimer la signalisation NF-κB activée.
• Pour l'ELISA, utilisez cet anticorps comme réactif de capture ou de détection ; la réactivité croisée avec l'IκBα non phosphorylé doit être évaluée en fonction du format du test.
• Comme l'anticorps réagit avec l'humain, la souris et le rat, il est adapté aux études translationnelles entre ces espèces ; incluez toujours des contrôles positifs et négatifs appropriés.

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